康寧基底膜基質(zhì)可以以幾種方式使用,。薄層凝膠法適用于在凝膠頂部接種細(xì)胞,,厚層凝膠法允許您在三位基質(zhì)內(nèi)培養(yǎng)細(xì)胞,薄層包被法(不凝膠化)給您提供了復(fù)雜的蛋白質(zhì)層,,您可以在其上培養(yǎng)細(xì)胞,。您的選擇基于您想要實(shí)現(xiàn)的最終結(jié)果,無論是細(xì)胞生長,、附著還是分化,。
注意:在康寧支持網(wǎng)頁上發(fā)布了具體的應(yīng)用程序*??祵幓啄せ|(zhì)產(chǎn)品的蛋白質(zhì)濃度是批次特異的并提供在分析證明書上,。通過計(jì)算需要的特定蛋白濃度(mg/mL)獲得了稀釋康寧基底膜基質(zhì)產(chǎn)品的一致結(jié)果。為了維持凝膠化的一致性,,我們推薦不要將康寧基底膜基質(zhì)稀釋到少于 3 mg/mL,。請使用冰冷的無血清培養(yǎng)基來稀釋康寧基底膜基質(zhì)。通過在冰上移液管上下吸液或渦旋小瓶來混合。
一,、薄層凝膠法
1. 依照推薦的方法解凍康寧基底膜基質(zhì),。使用預(yù)冷的移液管,將康寧基底膜基質(zhì)混合至均勻,。
2. 將培養(yǎng)板放置在冰上,,以 50 µl/cm2向生長表面加入康寧基底膜基質(zhì)。
3. 將培養(yǎng)板放置在 37 °C ,,30 分鐘,。
4. 如果有必要的話,請?jiān)谑褂脽o血清培養(yǎng)基輕柔漂洗前吸出未結(jié)合的材料,。請確保移液器的吸頭不要刮擦包被的表面,。培養(yǎng)板現(xiàn)在可以使用了。
二,、厚層凝膠法
1. 依照推薦的方法解凍康寧基底膜基質(zhì),。使用預(yù)冷的移液管,將康寧基底膜基質(zhì)混合至均勻,。
2. 將培養(yǎng)板放置在冰上,。向康寧基底膜基質(zhì)中加入細(xì)胞并使用預(yù)冷的移液管懸浮。以150-200 µl/cm2向生長表面加入康寧基底膜基質(zhì),。
3. 將培養(yǎng)板放置在 37°C,,30 分鐘。現(xiàn)在可以添加培養(yǎng)基了,。細(xì)胞也可以培養(yǎng)在這一凝膠的頂部,。
三、薄層包被法
1. 依照推薦的方法解凍康寧基底膜基質(zhì),。使用預(yù)冷的移液管,,將康寧基底膜基質(zhì)混合至均勻。
2. 使用無血清培養(yǎng)基將康寧基底膜基質(zhì)稀釋到需要的濃度,。對于您的應(yīng)用程序,,您應(yīng)該完成以經(jīng)驗(yàn)為主的研究來確定您的最適包被濃度。
3. 向被包被的容器中加入稀釋的康寧基底膜基質(zhì),。加入的量應(yīng)該足以容易地覆蓋整個(gè)生長表面,。在室溫下培養(yǎng) 1 個(gè)小時(shí)。
4. 吸出未結(jié)合的材料并使用無血清培養(yǎng)基輕柔地漂洗,。培養(yǎng)板現(xiàn)在可以使用了,。
康寧基質(zhì)膠代理——天津益元利康生物科技有限公司,成立于2018年,,坐落于天津經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū),。公司產(chǎn)品線涉及細(xì)胞與基因治療、免疫學(xué)、分子生物學(xué),、 細(xì)胞生物學(xué)等多個(gè)方向,,專注于生命科學(xué)試劑、耗材,、細(xì)胞,、儀器等產(chǎn)品銷售,經(jīng)營的品牌主要有:ThermoFisher,、Sigma,、Qiagen、EZBioscience,、ZYMO Research、MedKoo,、Abcam,、Elabscience、GeneTex,、Gentaur,、immunostar、Invitrogen,、invivogen,、Kerafast等等。我們提供質(zhì)優(yōu)價(jià)美的產(chǎn)品,、及時(shí)到位的服務(wù),,努力成長為生命科學(xué)和生物技術(shù)企業(yè)的優(yōu)質(zhì)供應(yīng)商。
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