臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(UCMSCs)是一種來源于臍帶的多潛能干細(xì)胞，具有廣泛的應(yīng)用前景,。臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞可以在進(jìn)行UCMSCs的復(fù)蘇過程中,，需要注意以下幾個主要步驟：
臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(umbilical cord mesenchymal stem cells, UC-MSCs)是一種來源于臍帶的多潛能干細(xì)胞，具有廣泛的應(yīng)用前景,。這些干細(xì)胞具有較強(qiáng)的自我更新能力和多向分化潛能,，能夠分化為多種細(xì)胞類型，如骨細(xì)胞,、肌肉細(xì)胞,、神經(jīng)細(xì)胞等。
臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基可用于臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的原代培養(yǎng)及多次傳代,，同時還能保持其多向分化的潛能,，如分化為骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞等,，使用時無需添加血清或血清替代物,。
以下是使用臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基進(jìn)行臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞復(fù)蘇的流程：
(1)將臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基平衡至室溫，每個培養(yǎng)瓶加入15ml 的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基,。
(2)取出凍存的細(xì)胞,，置入37℃水浴鍋中快速解凍。
(3)立即吸取解凍后的細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移1ml至15ml離心管中,，逐滴加入4ml臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基,，混勻后計數(shù)。
(4)根據(jù)計數(shù)結(jié)果,，按照合適的接種密度(推薦8000cells/cm2),。將細(xì)胞接種到已加入15ml 臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基的細(xì)胞培養(yǎng)容器中。
注：若細(xì)胞凍存液中不含DMSO,，可將細(xì)胞直接加入20ml臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基中,，且第二天無需換液。
(5)將細(xì)胞放在37℃,，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。
(6)12h~24h后，待細(xì)胞正常貼壁,，棄去培養(yǎng)上清,，加入新鮮的,、已平衡至室溫的20ml臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基。根據(jù)細(xì)胞生長情況,，每3天換液至細(xì)胞融合度達(dá)到80%~90%,。
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