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一,、抗體純化

為了提高特異性結(jié)合目標(biāo)抗原的免疫球蛋白濃度，抗血清,、腹水或細(xì)胞上清需要進(jìn)一步純化以去除非目標(biāo)抗原免疫球蛋白和其它血清蛋白,。無論是多克隆抗體還是單克隆抗體，純化方法的選擇至關(guān)重要,，其中單克隆抗體需要根據(jù)抗體亞型來選擇合適的親和介質(zhì)或沉淀方法,。多克隆抗體 一般選擇用抗原蛋白偶聯(lián)親和柱進(jìn)行特異性抗體收集。

二,、怎樣純化抗體才能提高特異性,？

目前常用的親和純化方式主要是抗原親和純化和 Protein A 或 G 純化。

1.抗原親和純化

抗原親和純化是基于抗原 - 抗體可逆結(jié)合的特性產(chǎn)生的一種純化免疫球蛋白的方法,，通過交聯(lián)到樹脂上的抗原,，純化出與抗原有特異性反應(yīng)的抗體，這一純化方法大量的去除了非特異性的免疫球蛋白成分,，得到的抗體特異性更高,。

2.Protein A 或 G 純化

Protein A 或 G 純化是利用金黃色葡萄球菌的蛋白 A(Protein A) 或鏈球菌的蛋白 G(Protein G)  對免疫球蛋白 Fc 段的高親和性，從抗血清中去除血清蛋白,，這一方法無法去除非特異性免疫球蛋白,。

3.兩種方式區(qū)別

用 Protein A 或 G 純化的多抗通常會有交叉反應(yīng),，在實驗中可能產(chǎn)生背景,、雜信號甚至假陽性,。

采用抗原親和純化，雖然得率較 Protein A 或 G 純化的低,，但抗體特異性得到很大提高,。

單克隆抗體大部分采用 Protein A 或 G 的純化方法，因為小鼠腹水成分比抗血清簡單且雜抗體含量比例小,，采用這一方法得到的單抗?jié)舛雀咔姨禺愋圆皇芨蓴_,。

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