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ELISA的基本原理

閱讀:487      發(fā)布時(shí)間:2024-10-10
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  ELISA,,全稱為:酶聯(lián)免疫吸附測定法 (enzyme-linked immunosorbent assay),是用于檢測體液中微量物質(zhì)的固相免疫測定方法,。它是一種特殊的試劑分析方法,,是在免疫酶技術(shù)( immunoenzymatic techniques ) 的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新型的免疫測定技術(shù)。那讓我們一起來看看ELISA的基本原理吧,!
 
  ELISA 的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記,。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,,又保留酶的活性,。在測定時(shí),受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng),。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上,。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,,底物被酶催化水解或氧化還原反應(yīng)而成為有色產(chǎn)物,,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,,使測定方法達(dá)到很高的敏感度。所生成有色產(chǎn)物的顏色深淺與欲測的抗原(抗體)含量成正比,。這種有色產(chǎn)物可用肉眼,、光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡觀察,,也可以用分光光度計(jì)(酶標(biāo)儀)加以測定,。其方法簡單,方便迅速,,特異性強(qiáng),。
 
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