一、細胞核結構：
細胞核的結構有核膜,、核仁,、染色質、核基質,。主要功能是遺傳物質DNA儲存和復制的主要場所,，是細胞遺傳和代謝的控制中心。
①核膜：核膜是細胞核的外部邊界,，由內(nèi)外兩層單位膜組成,，將細胞核與細胞質分隔開來。
②核孔復合體：核孔復合體是核膜上的特殊結構,，由多種蛋白質組成,，形成環(huán)狀開口，允許大分子物質如mRNA,、tRNA以及某些蛋白質在核質之間穿梭,。
③染色質：染色質是細胞核內(nèi)的重要組成部分，由DNA和蛋白質組成,，是遺傳信息的載體,。
④核仁：核仁是細胞核內(nèi)的一個致密結構區(qū)域，與核糖體的形成密切相關,。
⑤,、核基質或核骨架：核基質或核骨架是細胞核內(nèi)除染色質和核仁以外的所有成分，包括核液和核骨架兩部分,。
二,、對死細胞進行染色的核染料
(1) PI染料
PI，全稱為碘化丙啶（Propidium Iodide）,，是一種廣泛應用于細胞生物學和病理學研究中的細胞核染色試劑,。
PI染色原理：
在正常情況下，活細胞的細胞膜是完整的,，具有選擇透過性,，能夠阻止PI等大分子物質進入細胞內(nèi)部。
然而,，在細胞凋亡中晚期或壞死過程中,，細胞膜的完整性受到破壞，通透性增加,，使得PI能夠穿透細胞膜進入細胞內(nèi)部,。
進入細胞內(nèi)部的PI能夠特異性地與雙鏈DNA結合，形成PI-DNA復合物,，熒光強度增加20-30倍,。
這種復合物在特定波長的激發(fā)光照射下會發(fā)出紅色熒光,，從而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀觀察到細胞核的染色情況。
(2) EthD-I法
Ethidium Homodimer-I（EthD-I）又叫做同二聚乙錠-I,，是一種非細胞通透性活率指示劑,，它自身熒光很弱，但一旦與DNA結合后,，熒光會明顯增強（通常增強30多倍）,，發(fā)出紅色熒光（最大激發(fā)/發(fā)射波長分別為大約528/617nm）。由于EthD-I帶有較強的正電荷,，它不能穿過完整的活細胞膜,，因此通常用于檢測死細胞或細胞膜受損的細胞。當細胞膜完整性受損時,，EthD-I能夠進入細胞內(nèi)部并與DNA結合,，從而發(fā)出明亮的紅色熒光，指示細胞的死亡狀態(tài),。
(3) DAPI
DAPI中文4',6-二脒基-2-苯基吲哚,，是一種能夠對DNA進行染色的細胞核染料，與DNA中的A-T堿基對進行特異性結合,，形成穩(wěn)定的復合物,。這種結合不會改變DNA的二級結構，但會使DAPI的熒光強度顯著增強,。
三,、對活細胞進行染色的核染料
(1) Hochest
Hoechst染料是一類能夠穿透細胞膜并與DNA結合的非嵌入性熒光染料,通過與DNA中的堿基進行氫鍵結合，形成染料-DNA復合物,。該復合物在紫外光激發(fā)下會發(fā)射出藍色熒光,。由于DNA分子在細胞核中富集，因此Hochest染色可用于標記細胞核,。
(2) Draq 5
Draq 5是一種具有高親和力的遠紅外熒光活細胞DNA染料,，是一種對雙鏈 DNA 具有高親和力的蒽醌染料。它可以透過細胞膜的染料,，可標記活細胞或固定后/死細胞,。
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