細胞轉(zhuǎn)染是指將外源性基因?qū)氲郊毎麅?nèi)的技術(shù)。那你知道細胞轉(zhuǎn)染是如何分類的嗎,？讓我們一起來看看吧,！
一、根據(jù)導入的核酸存在于宿主細胞的時間長短,，可分為瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,。
瞬時轉(zhuǎn)染(transient transfection)：指將精心構(gòu)建的質(zhì)粒通過一定方式導入哺乳動物細胞內(nèi)，其中所攜帶的外源基因不與細胞內(nèi)基因組整合,。
細胞中外源基因的瞬時轉(zhuǎn)染表達時間有限,，通常僅持續(xù)數(shù)日，直至外源基因由于細胞分裂過程中的各種因素而喪失,。此方法常用于啟動子和其他調(diào)控元件的研究,。
目前，憑借多種轉(zhuǎn)染試劑的創(chuàng)新,，已能在哺乳動物細胞中實現(xiàn)瞬時轉(zhuǎn)染,，以生產(chǎn)具有適當折疊和翻譯后修飾的重組蛋白。
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染(Stable transfected)：外源DNA被整合到細胞基因組中或作為附加質(zhì)粒保留在細胞內(nèi)。與瞬時轉(zhuǎn)染不同,，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染能夠與宿主基因組整合,，因此轉(zhuǎn)染細胞及其后代細胞的基因組中同時保留了轉(zhuǎn)染的DNA。
由于穩(wěn)定轉(zhuǎn)染效率較低,，因此選擇有效的轉(zhuǎn)染策略和篩選方法至關(guān)重要,。
二、根據(jù)轉(zhuǎn)染方式可分為化學,、生物和物理方法,。
細胞由帶有負電荷的磷脂雙分子層構(gòu)成，對于大分子物質(zhì)而言,，其形成了不可透過的屏障,，例如DNA和RNA的磷酸骨架，它們也帶有負電荷,。為了讓核酸穿過細胞膜,，研究人員開發(fā)了多種技術(shù)，大致分為三類：
化學方法：利用載體分子包裹核酸,，使其呈現(xiàn)中性電荷或正電荷,。例如陽離子脂質(zhì)體方法、磷酸鈣共沉淀法,、其他陽離子物質(zhì)介導等技術(shù),。
生物方法：利用基因工程病毒將非病毒基因轉(zhuǎn)染至細胞中。目前較常見的是各種病毒介導的轉(zhuǎn)染技術(shù),。
物理方法：通過在細胞膜表面產(chǎn)生瞬時的孔道,，導入DNA。例如電穿孔法,、顯微注射法,。
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