蛋白質(zhì)的純化方法蛋白純化是指通過基因工程技術(shù)將編碼蛋白的核酸序列導(dǎo)入到宿主細(xì)胞,，使其大量表達(dá)，再使用適當(dāng)?shù)募兓椒▽⑵湓隗w外純化出來,，從而獲得高純度、活性和產(chǎn)量的蛋白質(zhì),。那么蛋白質(zhì)的純化方法都有什么嗎,？讓我們一起來看看吧！一,、凝膠層析：根據(jù)分子大小從混合物中分離蛋白質(zhì),，不同蛋白的形態(tài)和分子大小存在差異，在混合物通過含有填充顆粒的凝膠層析柱時(shí),，由于各種蛋白的分子大小不同,，擴(kuò)散進(jìn)入特定大小孔徑顆粒內(nèi)的能力也不同，大的蛋白分子會(huì)被先洗脫出來,，分子越小越晚洗脫,。二、離子交換層析：基于蛋白表面所帶電荷量不同進(jìn)行蛋白分離純化,，蛋白表面通常會(huì)均勻帶有一定的電荷,，在一定條件下可以與正/負(fù)離子交換柱結(jié)合。在改變pH或者用逐漸增加離子強(qiáng)度的緩沖液洗脫時(shí),，結(jié)合的物質(zhì)可與洗脫液中的離子發(fā)生交換而被洗脫到溶液中,。由于不同物質(zhì)的電荷不同，與離子交換柱的結(jié)合能力也不同,，因此被洗脫到溶液中的順序也不同,。三、疏水相互作用層析：利用蛋白質(zhì)的疏水性,，蛋白經(jīng)變性處理或處于高鹽環(huán)境下疏水殘基會(huì)暴露于蛋白表面,，不同蛋白疏水殘基與固定相的疏水性配體之間的相互作用強(qiáng)弱不同，依次用從高至低離子強(qiáng)度洗脫液可將疏水性由弱至強(qiáng)的成分分離,。四,、親和層析：將待純化的某一蛋白質(zhì)(或在蛋白質(zhì)上加上標(biāo)簽)的特異配體通過適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)方法共價(jià)連接到載體分子上，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)混合物加到填有親和介質(zhì)的層析柱時(shí),，待純化的蛋白質(zhì)與配體特異性結(jié)合,，而其他蛋白質(zhì)則不被結(jié)合,，通過洗滌除去，被特異結(jié)合的蛋白質(zhì)可以用含游離的相應(yīng)配體溶液洗脫下來,。更多有關(guān)蛋白質(zhì)的純化方法,，請(qǐng)聯(lián)系天津益元利康生物科技有限公司！
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