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Elabscience乙醛脫氫酶(ALDH)比色法測(cè)試盒適用于檢測(cè)動(dòng)物組織,、血清(漿)等樣本中乙醛脫氫酶(ALDH)的活力。

檢測(cè)原理：

酒精代謝的主要途徑是乙醇脫氫酶(ADH)氧化成乙醛,，然后是 NADH 依賴的乙醛脫氫酶(ALDH)氧化成乙酸,。本試劑盒檢測(cè)原理是底物在乙醛脫氫酶的作用下,，將 NAD+轉(zhuǎn)化為NADH，NADH在電子耦合劑的作用下使WST-8 顯橙黃色,，通過(guò)測(cè)定450 nm下吸光值變化可測(cè)得乙醛脫氫酶活性,。

樣本準(zhǔn)備：

① 樣本處理

血清(漿)樣本：直接測(cè)定。組織樣本：組織樣本使用生理鹽水(0.9% NaCl)勻漿處理,。離心后取上清進(jìn)行測(cè)定，部分上清樣本用于蛋白濃度測(cè)定。

② 樣本的稀釋

在正式檢測(cè)前,，需選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本稀釋成不同濃度進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,，結(jié)合本試劑盒的線性范圍：0.01–10.0 U/L。

操作步驟：

① 標(biāo)準(zhǔn)孔：取20μL 不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液加入相應(yīng)的酶標(biāo)孔中,。

測(cè)定孔：取20μL 待測(cè)樣本加入測(cè)定孔中,。

② 向步驟①中各孔依次加入160μL 反應(yīng)工作液,。

③ 向步驟②中各孔依次加入20μL 試劑四,。

④ 振板3 s，室溫避光靜置5 min,，酶標(biāo)儀450 nm下檢測(cè)各測(cè)定孔初始OD值 A1,。

⑤ 37°C下避光孵育反應(yīng)45 min,。

⑥ 酶標(biāo)儀于 450 nm 波長(zhǎng)檢測(cè)各測(cè)定孔OD值A(chǔ)2和各標(biāo)準(zhǔn)孔OD值,，計(jì)算測(cè)定孔變化 OD 值△A (注：△A = A2- A1,，標(biāo)準(zhǔn)孔只需要檢測(cè)A2值),。

產(chǎn)品選購(gòu)：