細胞培養(yǎng)基是供給細胞營養(yǎng),、維持細胞生長和增殖的多種營養(yǎng)物質(zhì)的混合物,，基礎(chǔ)細胞培養(yǎng)基主要包括199、MEM,、RPMI-1640,、DMEM、DMEM/F12等,。主要成分是氨基酸,、維生素、碳水化合物,、無機鹽和其它一些輔助物質(zhì),。人工合成培養(yǎng)基使用時還需添加一定量的血清使細胞生長和繁殖。培養(yǎng)基中各類添加成分所具有的作用是什么,？一起學(xué)習(xí)下吧,！
L-谷氨酰胺 (L-Glutamine)
是細胞培養(yǎng)液體環(huán)境中所必需的一種營養(yǎng)成分，是細胞生長的必須氨基酸,，為培養(yǎng)的細胞提供重要的能量來源,。脫掉氨基后，L-谷氨酰胺可作為培養(yǎng)細胞的能量來源,、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝,。但其在水溶液中不穩(wěn)定，易降解產(chǎn)生對細胞有害的氨,；而氨對于一些細胞具有毒性,。
L-丙氨酰-L-谷氨酰胺（L-alanyl-L-glutamine）
在水溶液中十分穩(wěn)定，不會自發(fā)降解,，其被細胞利用的機制為：細胞在培養(yǎng)時會向培養(yǎng)液中釋放一種肽酶,，將L-丙氨酰-L-谷氨酰胺逐漸水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺，這種將低濃度水平的L-谷氨酰胺逐漸釋放到培養(yǎng)液中的過程類似于流加培養(yǎng)策略,，可以提高L-谷氨酰胺的利用率,，且不會產(chǎn)生多余的氨，更利于細胞的生長,。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺適用于所有的細胞,，幾乎無需適應(yīng)，并且可以延長細胞的培養(yǎng)時間,，減少傳代次數(shù),，細胞活性降低得更慢,。L-丙氨酰-L- 谷氨酰胺的添加可能導(dǎo)致延滯期略微延長，其原因是肽酶的釋放和二肽的消化需要一定的時間,，但不會影響后續(xù)培養(yǎng),。
丙酮酸鈉（Sodium pyruvate）
可以作為細胞培養(yǎng)中的替代碳源，在葡萄糖不足的時候,，細胞可以代謝丙酮酸鈉,，保證細胞更好地生長。
HEPES (4-羥yi基哌qin乙磺酸)
是一種常用非離子兩性緩沖液,，能有效控制pH在6.8～8.2范圍,，尤其在pH7.2～7.4具有較好的緩沖能力。在開放式培養(yǎng)或細胞觀察時能維持較恒定pH值,。因此是一種優(yōu)良的生物緩沖劑,，對細胞無毒性作用，培養(yǎng)基添加HEPES后能夠較長時間保持恒定的pH范圍,，可以有效的防止培養(yǎng)液pH波動較大對細胞生長狀態(tài)產(chǎn)生的不利影響,。與其他緩沖液如PBS相比，HEPES在維持細胞培養(yǎng)基的pH值方面具有更高的穩(wěn)定性,。
酚紅
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為pH值的指示劑,，用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度，在低pH值時酚紅使培養(yǎng)液呈黃色,，而較高的pH值時使培養(yǎng)液呈紫色,，pH值7.2～7.4時為紅色，最shi合細胞培養(yǎng),。但酚紅也有一些缺點，研究表明酚紅可以模擬固醇類激素 (特別是雌激素)的作用,，因此在用到雌激素敏感的細胞時 (如乳腺組織),，最好使用不含酚紅的培養(yǎng)基。酚紅會干擾流式細胞分析時候的檢測,。此外,，一些無血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡。
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