細胞接種鋪板作為體外藥理實驗中最基本的技能,，是實驗成敗的關(guān)鍵因素。鋪板不勻又是科研實驗中通往成功道路的一大障礙,，細胞聚集導(dǎo)致的接觸抑制現(xiàn)象使實驗數(shù)據(jù)的可信度大打折扣,。本片文章將會介紹細胞鋪板不勻的解決方法有哪些？一起來跟小編漲知識吧,！
對于96孔板,，每孔通常加入100μL細胞懸液。加樣方式為傾斜槍頭,，從孔的左邊靠近底部緩慢加入（加樣過快同樣容易導(dǎo)致細胞聚集）,。筆者建議，每加完半拉板子時,，把細胞重新混勻,，繼續(xù)加樣。加樣結(jié)束后,，鏡下觀察如有局部不均勻現(xiàn)象,，可以采取敲擊法，具體操作如下：將板子置于臺面上,，左手持住板子的左邊,，右手輕輕敲擊板子的右邊緣(5-8次)，力度太強或次數(shù)太多會反而更易導(dǎo)致細胞聚集,。將板子順時針旋轉(zhuǎn),，依次敲擊剩余三個邊（據(jù)說逆時針效果不好），靜置約5-10分鐘后,，放入37℃培養(yǎng)箱,。
對于6孔板、12孔板或24孔板,，為防止表面張力導(dǎo)致的中間液面太低細胞聚集的現(xiàn)象,。通常每孔首先滴加少量培基，輕輕晃動浸潤整個孔底以保證板子的孔底都是濕潤的,，這樣加液后細胞懸液會平鋪在整個孔底,，可以避免加在中間位置和加在周邊晃勻后周邊細胞局部太多的現(xiàn)象,，細胞分散會較均勻。注意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下（5-10分鐘）,。鏡下觀察細胞均勻度,，如不均勻可采用以下8字法、十字法及震蕩法等方法進行細胞均勻度處理,。具體操作如下：
方法一(8字法)：這種方法也是大家最常見的細胞搖勻方法,。橫向8字搖勻法參考下圖，搖動次數(shù)根據(jù)鏡下觀察和個人力度具體分析（參考：保證液體不被晃動出去,，8字晃動5次理論上就可以基本晃勻）,。搖勻結(jié)束，切忌在鏡下移動觀察視野太久,，以免伴隨著輕微的移動,，細胞又往中間聚集。
方法二(十字法): 細胞鋪完板后,，在水平方向上,，上下左右四個方向進行移動,，呈十字形狀,，重復(fù)5-6次。有些同學(xué)覺得十字法搖勻效果并不好,，方法關(guān)鍵的是搖完后最好直接放入培養(yǎng)箱中,，不要再做過多的移動（也有同學(xué)建議可以在培養(yǎng)箱中搖勻）。另外,，同樣不建議放到鏡下長時間去觀察,。
方法三(十字類似法)：細胞鋪完板后，放在水平板面上先上下移動,，再左右移動,，每個方向5-6次。其他具體操作同十字法,。
方法四(震蕩法)：細胞懸液加完后,，將細胞培養(yǎng)板抬高，對著燈光,，從底部往上看,，看細胞有沒有抱團。然后從底部敲擊,，使之分散,。如果實驗室有平板振蕩器的話，我建議用這個儀器稍振蕩一下,，效果不錯,，就是振幅小,，頻率高的那種。（個人不太推薦這種方法,，板子接觸振蕩器后增加了染菌的風(fēng)險,，而且轉(zhuǎn)速的調(diào)節(jié)和時間的掌握比較困難）。
以上就是有關(guān)于細胞鋪板不勻的解決方法有哪些的問題解答,，如果你有更多問題請咨詢益元利康客服哦,！
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