本產(chǎn)品是質(zhì)譜分析前處理時zui常用的蛋白分解酶即賴氨酰肽鏈內(nèi)切酶,,該酶可以特異性切除賴氨酸基團C末端的多肽,可用于蛋白測序分析和Lys-X化合物的酶合成,。若同時使用賴氨酰肽鏈內(nèi)切酶和胰酶,,可更好地切斷賴氨酸 基團的多肽,增加多肽的數(shù)量,。產(chǎn)品已按照使用習慣做成小包裝,,是方便使用的冷凍干燥品。下面讓我們一起來看看Wako質(zhì)譜級賴氨酸肽鏈內(nèi)切酶(125-05061)的產(chǎn)品介紹吧,!
一,、產(chǎn)品屬性
來源:細菌
外觀:凍干粉(包含2 mmol/L Tris-HCl緩沖液,pH 8)
活性:0.03~0.07 AU/vial
分子量:27,000(瓊脂糖過濾),,30,000(SDS-PAGE)
溶解性:溶于水或緩沖液
穩(wěn)定性:溶解于pH值5.0-12.0的Tris緩沖液中,,可在4℃穩(wěn)定保存2年;在pH值6.0-11.0 30℃時能穩(wěn)定保存,,但溫度超過50℃時不穩(wěn)定,。
最適pH值:9.0~9.5
等電點:6.9~7.0
底物特異性:
可水解底物——Tos-Lys-OMe,,Bz-Lys-NH2,Bz-Lys-pNA,,Lys-pNA
不可水解底物——Bz-Arg-NH2,,Bz-Arg-pNA,Arg-pNA
抑制劑:DFP,,PMSF,,TLCK
二、特點
(1)高特異性,、高蛋白質(zhì)消化率,、適用于蛋白質(zhì)譜分析
(2)提高裂解效率、增加肽段數(shù)量
(3)根據(jù)使用量特意制備小包裝,,方便使用
三,、應用
分別采用胰蛋白酶(Tp)、賴氨酰肽鏈內(nèi)切酶 (Lys-C) 和Tp與Lys-C聯(lián)用進行膠內(nèi)酶切的效果比較,。牛血清蛋白BSA 的條帶(100 ng) 通過SDS-PAGE 獲得,,然后分別用Tp、Lys-C和Lys-C+Tp進行酶切,,再用MALDI-TOFMS法進行分析,。這些蛋白酶的實驗效果見下表,。
胰蛋白酶 (Tp)(圖a) 和賴氨酰肽鏈內(nèi)切酶 (Lys-C)+Tp (圖b) 酶切后的質(zhì)譜結(jié)果對照圖,。
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