抗體特異性驗證方法有什么,？
抗體特異性從始至終備受重視，那么你知道抗體特異性驗證方法有什么嗎,？讓我們一起來看看吧,！
一、RNA 干擾(RNA Interference)
RNA 干擾是與靶基因序列同源的雙鏈 RNA(dsRNA)所誘導的一種特異性基因沉默,，可以迅速阻斷基 因活性,。siRNA(Small Interfering RNA) 是一種小 RNA 分子(大約 21-25 核苷酸) ，siRNA 只降解與其序列互補配對的 mRNA,， 其調控的機制是通過互補配對來降低相應靶位基因的表達,，所以是一種典型的負調控機制。
在抗體特異性檢測中,，可以通過這種“基因敲降"的方法來驗證目標蛋白表達量降低時,，抗體與抗原發(fā)生結合產(chǎn)生的目的條帶 是否會消除或降低。
二,、基因敲除(Knock Out,，KO)
基因敲除是一種遺傳工程技術，敲除目的基因,，產(chǎn)生目的蛋白不表達的陰性樣品,，從而使部分功能喪失， 并可進一步對生物體造成影響,，進而推測出該基因的生物學功能,。在抗體特異性檢測中，可以通過這種“基因敲除"方法來驗證目標蛋白缺乏時,，抗體是否會發(fā)生非特異性結合,。
三、天然陰性樣本
天然陰性樣本是指部分蛋白質存在組織,、細胞特異性,，可以利用天然不表達的細胞或組織作為陰性對照：如 CD20 不在 T 細胞中表達，PAX8 不 在 Hela 細胞中表達,。此外,，某些蛋白質在特定的生理條件下才表達,，或降低表達，或表達量的改變,，也可以作為特異性的參考依據(jù),。
四、酶法檢測
適用于修飾蛋白的抗體驗證,。蛋白質通常會有一些修飾形式,，如磷酸化，糖基化等,，可以通過檢測修飾前后 western blot 條帶的變化來判斷抗體的特異性,， 這時候就需要添加相應的酶來去除這些修飾形式，如磷酸酶,，糖苷酶等,。酶法檢測是驗證抗體特異性的較為迅速簡便的方法。
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