酶聯(lián)免疫吸附試驗(Enzyme-linked Immunosorbent Assay, ELISA) 技術從1970年代發(fā)展至今已近半個世紀,是一項實驗室最基本的免疫檢測技術,,被廣泛的應用于基礎研究和臨床檢驗,。那么面對市面上數(shù)以千計的試劑盒,數(shù)百家供應商,,該如何選擇適合的ELISA試劑盒呢,?讓我們一起來看看吧!
一,、明確研究種屬
一般來說,,廠家都會在產(chǎn)品名稱上標明種屬,且為shou個單詞,,檢索種屬的常用語言為英文,。
如果您需對不同物種的同一因子進行定量,建議優(yōu)先尋找適用于多個種屬的 ELISA 試劑盒,,產(chǎn)品介紹中會注明「Multi-species」,。
二、明確樣本類型
不同廠家驗證樣本類型不同,,即使同一廠家不同試劑盒,,其驗證樣本類型也不盡相同。特別是復雜的血漿樣本,,根據(jù)樣本處理方式的差異,,分為 EDTA 血漿、肝素抗凝血漿和檸檬酸鹽血漿,,因此購買前需仔細核對,。
三、預測目標因子的濃度
一般來說,,待測因子可以根據(jù)經(jīng)驗或資料獲得參考的檢測范圍,,且正常人與疾病狀態(tài)存在差異。如熱門炎癥因子 IL-6,,正常人血清中濃度為 3.13 pg/mL,,病人會顯著增高,,CAR-T 回輸病人血清中的 IL-6 濃度甚至為正常人的 200 倍以上。
因而,,必要時進行樣本的稀釋及選擇合適檢測范圍的試劑盒極其重要,。
若濃度太低,可選擇高敏試劑盒;若不確定待測濃度或樣本間濃度差異較大,,建議使用檢測動態(tài)范圍更寬的化學發(fā)光法ELISA試劑盒,。
四、檢查試劑盒進行過哪些質(zhì)控
質(zhì)控數(shù)據(jù)在說明書中即可找到,,在購買前檢查試劑盒是否進行過嚴格的質(zhì)控實驗,,包括批次內(nèi)(Intra-Assay)及批次間(Inter-Assay)、摻入回收實驗,、線性稀釋實驗及交叉反應測試等,,每個數(shù)據(jù)最好都看一下,確保chao強的結果重現(xiàn)性及準確性,。
五,、確定需檢測的因子數(shù)量
如果待測因子超過 5 個,且樣本量較小時,,單因子 ELISA 檢測方法并不是最jia選擇,。
建議考慮多因子檢測方法,如固相芯片(樣本數(shù)量一般 5 個以內(nèi),,檢測指標可達上百個)及 Luminex 液相芯片方法 (檢測樣本多達 80 個,,檢測指標多達 50 個)或微流控 ELISA 檢測系統(tǒng) Ella。
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