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PCR/qPCR耗材選擇——一般特征篇

閱讀:1354      發(fā)布時間:2023-2-13
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1)規(guī)格

常見的PCR/qPCR耗材規(guī)格如下

管:0.5 mL, 0.2 mL, 0.1 mL

96 孔板:0.2 mL, 0.1 mL

384 孔板:0.02 mL

PCR/qPCR/板的規(guī)格決定了反應(yīng)體積如果加入過多的樣品,,一方面會導(dǎo)致熱傳導(dǎo)的效率下降,,另一方面會導(dǎo)致樣品溢出或者污染;如果加入的樣品過少,,又會因為頻繁的熱循環(huán)導(dǎo)致水分蒸發(fā),,進(jìn)而導(dǎo)致體系不足、樣品損耗,,實驗出現(xiàn)誤差或者無結(jié)果,。并且選用的耗材需根據(jù)PCR儀的加熱模塊來決定,以求最DA程度的熱傳導(dǎo)的匹配,。

2)高度

PCR/qPCR/板有不同高度的選擇,,其中“低容(low profile"的管/板意思是說,與普通的管/板相比,,它們的高度更低,,這樣的設(shè)計能最大成大的減少反應(yīng)體系上方的空間,減少了蒸發(fā)對體系的影響,,并且提高了熱傳導(dǎo)的效率,。因此更推薦優(yōu)先使用低容的管/板。

3厚度

PCR/qPCR/板要求管壁厚度的一致性,,可以保證熱傳導(dǎo)的一致性,。除標(biāo)準(zhǔn)厚度外,目前超薄壁的耗材也受到了廣泛的應(yīng)用,,這種超薄壁的管/板管壁厚度約是標(biāo)準(zhǔn)版的50%,,可以進(jìn)一步減少熱障,使熱傳遞進(jìn)行更快,,PCR反應(yīng)更加穩(wěn)定,。

4透明度

對于普通PCR來說,,管材的透明度對擴(kuò)增結(jié)果無影響。對于qPCR來說,,管身應(yīng)選擇不透明的白色或者磨砂質(zhì)地的,,而管蓋或者密封膜則要求具有高度的光學(xué)透性,以保證熒光信號傳遞最佳,,并且降低反應(yīng)中的失真,。


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