OmnimABs 進(jìn)口胎牛血清是妊娠后期未出生的剖腹取胎牛的血清。
不同批次OmnimABs 進(jìn)口胎牛血清對細(xì)胞生長的促進(jìn)作用不同大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)中由血清引起的細(xì)胞生長狀態(tài)不佳及病毒滴度的影響表現(xiàn)在以下幾方面:
1,、細(xì)胞生長速度緩慢,,長滿單層時(shí)間長:從同一細(xì)胞瓶中分出兩瓶細(xì)胞,用同一種培養(yǎng)液,,分別加入 10%的對照血清和待檢血清,,在相同條件下培養(yǎng) 72小時(shí),會出現(xiàn)對照血清長滿單層,,而待檢血清大約只有60~70%,,這種血清就不適合用來大規(guī)模培養(yǎng)細(xì)胞。
2,、細(xì)胞傳代后形態(tài)不正常,,細(xì)胞狀態(tài)發(fā)生變化:由于血清的質(zhì)量問題,使原本狀態(tài)正需的細(xì)胞經(jīng)傳代后形態(tài)會變差,;比如:細(xì)胞瓶里會出現(xiàn)一些蠕動的小黑點(diǎn)(并非污染),,或者細(xì)胞表面形成一層油狀覆蓋物;細(xì)胞的輪廓變得模糊,,細(xì)胞之間的間隙被血清中的蛋白顆粒填充,,從而影響細(xì)胞向四周擴(kuò)展生長。
3,、細(xì)胞傳幾代后就出現(xiàn)脫壁現(xiàn)象,,不能連續(xù)傳代;質(zhì)量較差的血清缺乏某種細(xì)胞的貼壁因子,,會使細(xì)胞在傳代過程中逐漸喪失貼壁的能力,。細(xì)胞會從正常的貼壁狀態(tài),邊緣開始腐壞,,上翹,。觀察到的現(xiàn)象就是細(xì)胞表面不光滑,晃動細(xì)胞瓶會看到細(xì)胞表面有絮狀物隨培養(yǎng)液波動,。隨著傳代次數(shù)增加,,細(xì)胞腐壞的情況越來越嚴(yán)重,直到終*脫壁而死亡,。
4、細(xì)胞長的很好,,致密的單層,,狀態(tài)也很正常,,但是接毒后細(xì)胞基本不發(fā)生病變,做滴度檢測幾乎測不出抗原滴度,。這種情況也許是因?yàn)檠逯泻信c接種的病毒有同源的特異性抗體,。比如血清中經(jīng)常會存在乙腦抗體,牛腹瀉病毒抗體等,,如果存在這些抗體,,就會把接進(jìn)去的病毒給中和掉。如果抗體滴度很高,,病毒會被抗體*中和,,就沒有病毒顆粒在細(xì)胞中增殖,所以會檢測不到病毒滴度,。
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