原理
Trizol 試劑是一個包含酚,、異硫氰酸胍和 SDS 的單相酸性溶液，其在裂解細胞的同時抑制 RNase 的活性,，隨后加入氯仿,，酚會大量的溶解在氯仿中。由于 DNA 和 RNA 在酸性酚中的溶解性不同，造成 DNA 分布在下層的氯仿酚溶液中,，RNA 則分布在上層的水相中,，最后用異丙醇沉淀水相中的 RNA，并用 70% 乙醇洗滌沉淀,，這樣就可以得到比較純凈的總 RNA,。
材料與儀器
動物組織、液氮,、Trizol 試劑,；
步驟
1、 先在研缽中加入液氮,，再將組織剪成小塊在液氮中磨成粉末,，用液氮預冷的藥匙取 50-100 mg 組織粉末加入已盛有 1 ml 的 Trizol 液的 EP 管中（注意組織粉末總體積不能超過所用 Trizol 體積的 10%），充分混合均勻,。
2,、室溫放置 5 min，然后加入 200 μl 的氯仿,，蓋緊 EP 管并劇烈搖蕩 15 秒鐘,。
3、12, 000 rpm 離心 10 min,，取上層水相于一新的 EP 管中（千萬不要將中間的沉淀層和下層液混入,，否則重新離心分離），加入 500 ul 異丙醇,，溫和顛倒混勻,。室溫放置 10 min，12, 000 rpm 離心 10 min,。
4,、小心地棄去上清液，加入 1 ml 的 75% 乙醇,，渦旋混勻，4℃ 下 12, 000 rpm 離心 5 min,。重復操作一次,。
5、棄去上清液（盡量將殘余液體除去）,，室溫或真空干燥 5-10 min（注意不要干燥過分,，否則會降低 RNA 的溶解度）。用 30 ul DEPC 處理過的水將 RNA 溶解,，必要時可 55℃-60℃ 水浴 10 min,。RNA 可進行 mRNA 分離，或貯存于 70% 乙醇并保存于 -70℃。
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