骨髓鉆孔活組織檢查或三維細(xì)胞培養(yǎng)的組織微陣列,，在顯微鏡觀察中是特別困難的課題

MDS作業(yè)團(tuán)隊(duì)由碩士課程的學(xué)生2名、研究醫(yī)生1名,、BTA（生物學(xué)技術(shù)助理）1名組成,。

蓋特曼博士說(shuō)道“試用熒光顯微成像系統(tǒng)BZ系列后，被其超高的性價(jià)比,，以及豐富的模塊帶來(lái)的可擴(kuò)展性所折服,。像我們這樣的小規(guī)模作業(yè)團(tuán)隊(duì)也可從財(cái)團(tuán)獲得資金而得以購(gòu)買，而表示衷心感謝,。相信可逐步擴(kuò)充新的模塊",。

團(tuán)隊(duì)中負(fù)責(zé)對(duì)3種血液腫瘤進(jìn)行細(xì)胞級(jí)別研究的成員，已將正置熒光顯微成像系統(tǒng)作為標(biāo)準(zhǔn)器械使用,，成功實(shí)施了使用最多7個(gè)熒光染料的Opal多重IHC實(shí)驗(yàn),。但是，該顯微鏡無(wú)法滿足他們的各種需求,，這是導(dǎo)入熒光顯微成像系統(tǒng)BZ系列的原因之一,。

該團(tuán)隊(duì)獨(dú)立開(kāi)發(fā)出MDS骨髓鉆孔活檢查TMA（組織微陣列）。該TMA包括AML（急性骨髓性白血?。┗颊叩慕M織和正常對(duì)照組的組織進(jìn)行對(duì)比,。評(píng)價(jià)TMA相關(guān)免疫組織化學(xué)研究時(shí)，熒光顯微成像系統(tǒng)BZ系列的一大優(yōu)點(diǎn)在于,，可將TMA上的一個(gè)樣本或多個(gè)樣本匯總至1張圖像,。

蓋特曼博士說(shuō)道“要在1張圖像中顯示2  mm的核,，圖像拼接功能尤其重要",。

圖像拼接功能對(duì)骨髓前體細(xì)胞的in vitro培養(yǎng)評(píng)價(jià)也有效。例如,，準(zhǔn)備以有核紅細(xì)胞的線粒體為目標(biāo)結(jié)構(gòu)進(jìn)行研究時(shí),，熒光顯微成像系統(tǒng)BZ系列的一大優(yōu)點(diǎn)當(dāng)然是倒置的光路，由此能夠輕松進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的定位與評(píng)價(jià),。另外西蒙·布里爾（BTA）補(bǔ)充說(shuō)道,。“這個(gè)顯微鏡和軟件可以讓觀察更加直觀,。使用分析軟件,，可通過(guò)各種方法輕松地快速處理圖像"

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1. 鐵粒幼細(xì)胞性貧血的病理

鐵粒幼細(xì)胞性貧血是指,，在紅血球生成前體細(xì)胞的線粒體中過(guò)度蓄積大量鐵的特殊MDS,。該疾病從1950年代開(kāi)始被人知曉，但其機(jī)制仍不明確,。若干年前發(fā)現(xiàn)75至80％的鐵失利用性貧血患者存在SF3B1基因的剪接體變異,。就是說(shuō)，線粒體吸收鐵后,，被稱為亞鐵螯合酶的酶無(wú)法將鐵高效吸入原卟啉,，導(dǎo)致鐵大量蓄積在線粒體基質(zhì)。最終導(dǎo)致血紅素合成驟減,。如果沒(méi)有血紅素,，細(xì)胞就會(huì)發(fā)出“鐵不足"的信號(hào)，導(dǎo)致線粒體中的鐵過(guò)剩進(jìn)一步加劇,。過(guò)剩的鐵使線粒體發(fā)生氧化,、損傷。

加深對(duì)線粒體膜的相互作用的理解

為了探究鐵與卟啉無(wú)法順利結(jié)合的原因,，蓋特曼博士正在研究線粒體內(nèi)膜或基質(zhì)的蛋白質(zhì)相互作用,。使用熒光顯微成像系統(tǒng)BZ系列，通過(guò)PLA（鄰位連接技術(shù)）將蛋白質(zhì)間相互作用可視化為熒光信號(hào),，檢查膜復(fù)合體中是否有構(gòu)造異常,。另外使用光學(xué)切片功能，還可獲得無(wú)熒光模糊的清晰圖像,。僅抽取來(lái)自各對(duì)焦平面的信號(hào)，可創(chuàng)建全幅對(duì)焦圖像,。作為研究對(duì)象的蛋白質(zhì)相互作用中,，有亞鐵螯合酶與“線粒體血紅素代謝復(fù)合體"的相互作用參與，其中一部分是過(guò)渡性物質(zhì),。

研究醫(yī)生法蒂梅·馬蒂迪回憶道,，“訪問(wèn)波恩的作業(yè)團(tuán)隊(duì)時(shí),，偶然看到了BZ系列的展示。立刻被這個(gè)小型裝置所具有的各種功能所折服",。

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2. 三維細(xì)胞培養(yǎng)中骨髓異常增生綜合征的病理

蓋特曼博士及其團(tuán)隊(duì)，為了確認(rèn)骨髓前體細(xì)胞的運(yùn)動(dòng),，目前已在研究室確立了三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),。以往只能進(jìn)行普通的二維集落分析實(shí)驗(yàn)。三維培養(yǎng)是造血前體細(xì)胞在半固體培養(yǎng)基中形成集落,，并在該狀態(tài)下進(jìn)行研究的方法,。但是，三維細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)顯微鏡的要求更高,，由此熒光顯微成像系統(tǒng)BZ系列的Z棧功能及圖像拼接功能,、光學(xué)切片功能得以發(fā)揮真正價(jià)值。這些功能成為導(dǎo)入熒光顯微成像系統(tǒng)BZ系列的決定因素,。蓋特曼博士等針對(duì)三維細(xì)胞培養(yǎng)的免疫組織化學(xué)及核染色,、DNA-RNA混合構(gòu)造的檢測(cè)等用途，正在開(kāi)發(fā)新的可視化方法,。

3. 醫(yī)藥品開(kāi)發(fā)：NEDD化抑制劑

對(duì)于還未充分驗(yàn)證效果的NEDD化抑制劑,，當(dāng)前正在進(jìn)行臨床試驗(yàn)。蓋特曼博士的團(tuán)隊(duì)正在研究該新藥對(duì)造血前體細(xì)胞及其分化產(chǎn)生哪些影響,。其中EGFR（表皮生長(zhǎng)因子受體）的PLA（鄰位連接技術(shù)）檢測(cè)細(xì)胞表面的受體同源二聚化,，其結(jié)果是在細(xì)胞內(nèi)部發(fā)生受體的磷酸化反應(yīng)，從而充當(dāng)細(xì)胞增殖時(shí)的信號(hào)的效果,。在進(jìn)行采訪時(shí),，由于初期結(jié)果還沒(méi)有發(fā)表，因此無(wú)法提供更準(zhǔn)確的信息,。

對(duì)于蓋特曼博士的作業(yè)團(tuán)隊(duì)來(lái)說(shuō),，熒光顯微成像系統(tǒng)BZ系列的導(dǎo)入是重大的進(jìn)步。在杜塞爾多夫大學(xué)內(nèi)的過(guò)渡項(xiàng)目中其他研究人員也將使用BZ系列,。