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大家有沒有試過,，把培養(yǎng)基凍起來，顏色會(huì)有變化嗎,？顏色一開始變黃,！解凍以后，又會(huì)慢慢變紅,！為什么呢,？

如果凍的液體是水，或是緩沖液,，顏色會(huì)有變化嗎,？

并不會(huì)有變化,！

原因是因?yàn)椋囵B(yǎng)基中會(huì)加入酸堿指示劑,，例如酚紅,，用于檢測(cè)培養(yǎng)基的酸堿性。當(dāng)培養(yǎng)基酸性增加時(shí),，酚紅會(huì)呈現(xiàn)黃色,，當(dāng)培養(yǎng)基堿性增加時(shí)，酚紅會(huì)呈現(xiàn)紅色,。

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,，細(xì)胞代謝會(huì)產(chǎn)生酸性代謝產(chǎn)物，使培養(yǎng)基酸性增加,，因此培養(yǎng)基會(huì)逐漸變黃,。當(dāng)培養(yǎng)基解凍后，酸性代謝產(chǎn)物逐漸消耗,，培養(yǎng)基的酸性減少,，導(dǎo)致酚紅顏色逐漸變回紅色。

如果凍結(jié)的液體是水或緩沖液,，一般不會(huì)出現(xiàn)顏色的變化,。這是因?yàn)樗途彌_液不含有酸堿指示劑，所以當(dāng)其凍結(jié)和解凍時(shí),，顏色不會(huì)發(fā)生變化,。

為什么細(xì)胞培養(yǎng)基冷凍以后，會(huì)變酸呢,？

細(xì)胞培養(yǎng)基凍結(jié)后變酸的原因是由于冰凍過程中,，液體中的二氧化碳和其他氣體會(huì)逸出。冰結(jié)過程中,，水分子會(huì)有序排列形成晶體,，氣體無法溶解在冰中，因此逸出,。培養(yǎng)基中二氧化碳的減少會(huì)導(dǎo)致酸堿度的變化,，使培養(yǎng)基變酸，從而導(dǎo)致培養(yǎng)基的顏色變黃,。

培養(yǎng)箱的CO2濃度為什么要設(shè)置5%,？

培養(yǎng)箱的CO2濃度設(shè)置為5%是為了模擬細(xì)胞/組織在生物體內(nèi)的生長(zhǎng)環(huán)境，并提供適合細(xì)胞體外培養(yǎng)的條件,。培養(yǎng)箱要求穩(wěn)定的溫度,、CO2水平、酸堿度和濕度,，其中CO2濃度的穩(wěn)定性對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)非常重要,。

以常用的細(xì)胞培養(yǎng)基DMEM為例,，其碳酸氫鈉濃度為1.5g/L。廠家已經(jīng)測(cè)試好對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)箱濃度在5%左右,，假如該培養(yǎng)基碳酸氫鈉濃度變?yōu)?g/L，則培養(yǎng)箱CO2濃度應(yīng)維持在10%,。

國(guó)外常用的培養(yǎng)條件就是,，1升培養(yǎng)基里含3克NaCO3，CO2培養(yǎng)箱的濃度是10%,。而國(guó)內(nèi)大多數(shù)是5%的濃度,，相對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)基內(nèi)碳酸氫鈉濃度就在1.5g/L左右。