用壓力泵實時檢測細(xì)胞增殖(培養(yǎng))
用壓力泵實時檢測細(xì)胞增殖(培養(yǎng))
這是微納立方第28篇微流控推文
咱做細(xì)胞增殖檢測,,有計數(shù)法,、染色法……但很多方法都只能檢測一個時間點,就是說只能看到細(xì)胞增殖的結(jié)果,,而不清楚過程,,并且往往需要額外的儀器和試劑。這次和你分享一個不一樣的視角,,用壓力泵去實時檢測細(xì)胞增殖,,這個實驗由康比涅技術(shù)大學(xué) (UTC)的一個生物工程實驗室完成。
實驗比較簡單:用1個壓力泵往1塊細(xì)胞培養(yǎng)芯片里泵入培養(yǎng)基(5組采用同款芯片,,且均含流量計),。
老規(guī)矩,咱先來看一組實驗數(shù)據(jù),,下圖里的縱坐標(biāo)是壓力泵的輸出壓力,,橫坐標(biāo)是芯片里的細(xì)胞數(shù)。
圖里值得說的是3個顏色區(qū)域的點:
綠色點位,,設(shè)置恒定流量10μL/min,這時微流控芯片里還沒有細(xì)胞,。
藍(lán)色點位,,芯片里有細(xì)胞貼壁了,,恒流模式使得所需壓力增大。
紅色點位,,養(yǎng)了3天的細(xì)胞,,細(xì)胞增殖數(shù)目變多,恒流所需壓力更大,。
圖中藍(lán)色虛線是擬合出的壓力和細(xì)胞數(shù)的線性函數(shù)——到這你可能看不下去了,,就這么點數(shù)據(jù)還擬合函數(shù)?有沒有點數(shù)學(xué)常識,?但事實上,,這個函數(shù)的樣子,正好符合了數(shù)學(xué)公式:微流控芯片里流道的流量=壓力/流阻(Q=△P/R),,Q表示流量,,△P表示壓力,R表示流阻,。
如果細(xì)胞正常增殖,,細(xì)胞數(shù)增多了,會造成芯片內(nèi)流道變窄,,肯定會導(dǎo)致流阻變大(流阻R與h^3*w成反比,,h和w分別為芯片流道道的高和寬,點這看流阻是怎么計算的),,為了滿足咱設(shè)定的10μL/min的流量,,壓力泵的輸出壓力一定會增大。就是說,,恒流模式下,,細(xì)胞正常增殖,流阻變大,,壓力泵輸出壓力就應(yīng)該變大,,如果壓力不變或者縮小(細(xì)胞被沖走),,反而是問題,。
所以重要的不是擬合出什么樣的函數(shù),而是這個函數(shù)要符合壓力和細(xì)胞數(shù)的正相關(guān)關(guān)系,,就是說這個函數(shù)上某個點的斜率,,一定得是正的,不然細(xì)胞增殖就有問題,。也許在你的實驗里,,它就變成了個指數(shù)函數(shù)(有點夸張了,如果壓力像指數(shù)函數(shù)那樣增加,,一定是發(fā)生堵塞了),。
你可能覺得檢測要精準(zhǔn),,不能這樣看大概,但做一次細(xì)胞增殖(培養(yǎng))動不動就好幾天,,等做完才發(fā)現(xiàn)問題,,浪費時間還耽誤進(jìn)度,而這個辦法,,只需要你看一眼壓力泵的輸出壓力,。就像是如果你發(fā)燒了,一定要去醫(yī)院讓醫(yī)生來告訴你嗎,?自己摸摸額頭也能知道,。
P.s. 以上說的細(xì)胞增殖為理想情況,如果染菌,,菌類生長也會讓壓力變大,。
最后附上這個實驗的配置:法國Fluigent的壓力泵Flow EZ和流量計,加細(xì)胞培養(yǎng)芯片,、細(xì)胞系和培養(yǎng)基,,以及連接配件。
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如何計算微流控系統(tǒng)里的流阻,?
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