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Hs-746T 人胃癌細胞
Product Format: a T25 flask
Culture Properties:貼壁
Complete Growth Medium: 1640+10%FBS+1%雙抗
Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
Application: Cells and cancer research
NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.
Components
Item | Specifications |
a T25 flask | 2X106 |
Manual | 1 copy |
細胞培養(yǎng)操作步驟
吸走多余培養(yǎng)基,,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞,;
吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰-酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰-酶浸沒細胞表面,,培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化,;
(細胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴重影響細胞狀態(tài),,導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長,。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,,禁止消化到細胞*漂浮,。混勻細胞時盡量輕柔,,不要吹出大量氣泡,。)
加入6-8ml*培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹下細胞混勻,;
將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,,棄上清,再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)(建議T25瓶加10-12ml*培養(yǎng)基,,10cm皿加12-15ml),;
傳代比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,,生長較慢的細胞可以1:2傳代。
細胞冷凍保存
1.凍存液:92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(可以根據實驗室條件自行選擇)
2.降溫步驟:4度10min,,-20度2h,,-80過夜后液氮保存。
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