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Hs 578T 人乳腺癌細(xì)胞

Product Format: a T25 flask

Culture Properties：貼壁（貼壁弱,，消化時(shí)間短，消化時(shí)間過長會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞不長,；建議使用原裝培養(yǎng)體系,；有限傳代細(xì)胞，建議及早進(jìn)行實(shí)驗(yàn)）

Complete Growth Medium: H-DMEM+10%FBS+1%雙抗

Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

Application:  Cells and cancer research

NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

Components 

細(xì)胞培養(yǎng)操作步驟

1. 吸走多余培養(yǎng)基,，加入3-5mL PBS后輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,；

2. 吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰-酶-0.53mM EDTA，輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰-酶浸沒細(xì)胞表面,，培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化,；
        （細(xì)胞對(duì)于消化比較敏感，消化過度會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞狀態(tài),，導(dǎo)致細(xì)胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長,。細(xì)胞消化到細(xì)胞間隙變大但未脫落，可以輕輕吹下時(shí)即可終止,，禁止消化到細(xì)胞*漂浮,。混勻細(xì)胞時(shí)盡量輕柔,，不要吹出大量氣泡,。）

3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹下細(xì)胞混勻,；

4. 將混勻的細(xì)胞1000rpm（約150g）離心3min,，棄上清，再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)(建議T25瓶加10-12ml*培養(yǎng)基,，10cm皿加12-15ml),；

傳代比例: 不同細(xì)胞生長速度不一，具體傳代比例視細(xì)胞生長速度而定,，大部分細(xì)胞適用1:3-1:4傳代,，生長較慢的細(xì)胞可以1:2傳代。

細(xì)胞冷凍保存

1.凍存液：92%*培養(yǎng)基+8%DMSO（可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件自行選擇）

2.降溫步驟：4度10min,，-20度2h,，-80過夜后液氮保存。

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