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NCI-H1688 人經典小細胞肺癌細胞（STR鑒定）

簡介：

該細胞是1982年由Carney D和Gazdar AF等從一位小細胞肺癌患者的胸腔積液中建立的,。細胞的原始形態(tài)并不具有小細胞肺癌特征,。這個細胞株是小細胞肺癌的生化和形態(tài)學上的變種,，表達神經元te有的烯醇酶和腦型肌酸激酶同工酶；左旋/多巴脫羧酶,、蠶素,、抗利尿激素,、催產素或胃泌激素釋放肽未達到可檢測水平,。與正常細胞相比，該細胞c-myc DNA序列擴增約20倍,，RNA增加15倍,。最初傳代培養(yǎng)基用含有5%FBS的RPMI1640，另外添加10 nM氫化可的/松,、0.005 mg/ml胰島素,、0.01 mg/ml轉鐵。

細胞特性：

1） 來源：肺;癌;經典小細胞肺癌

2） 形態(tài)：上皮細胞樣   貼壁生長

3） 含量：>1x10^6  細胞數

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5）用途：僅供科研使用,。

運輸和保存：

干冰運輸及復蘇好存活細胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運輸,，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系,。

（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

細胞接收后的注意事項：

1）收到細胞后,，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,，若發(fā)現培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,，請拍照后及時聯系我們,。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×,，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收,，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完培6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng),。若細胞生長密度達70%-80%以上,，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收,。

4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞,，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完培來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 ,。

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備1640培養(yǎng)基,；優(yōu)質胎牛血清,，20%,；雙抗，1%,。

備注：該細胞較難培養(yǎng),，細胞訂購需提前2-3周。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現用現配。

細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入到含4-6mL完培的離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液,，完培重懸細胞,。然后將細胞懸液加入含6-8ml完培的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度,。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。

NCI-H1688 人經典小細胞肺癌細胞（STR鑒定）

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