目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司>>科研細(xì)胞>>細(xì)胞系>> 復(fù)蘇/凍存SHP-77 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞(STR鑒定)
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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貨號 | YLK-XB1314h | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | SHP77 |
SHP-77 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞(STR鑒定)
簡介:
SHP-77 保留了SCLC的重要特征,具有穩(wěn)定的生物化學(xué)特性,,可以連續(xù)培養(yǎng),。該細(xì)胞系是小細(xì)胞肺癌中一種不常見的未分化大細(xì)胞突變體。它雖然具有突變體的形態(tài),,但保持了經(jīng)典SCLC的生化特性,。電子顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)存在腺體形成和胞漿內(nèi)板層體(intracytoplasmic lamellar bodies)。這些細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)記物L(fēng)-多巴脫羧酶和致密核心分泌顆粒(dense core secretory granules),。
SHP-77可用做檢測51Cr和111In釋放對體外細(xì)胞及裸鼠體內(nèi)毒性的靶標(biāo),,用于評估肺癌患者的細(xì)胞和血清的免疫反應(yīng)水平。該細(xì)胞可用于評估接受放射或化學(xué)療法治療的SCLC患者的免疫狀況,。經(jīng)本庫STR檢測無誤,。
細(xì)胞特性:
1) 來源:54歲 男性 肺; 小細(xì)胞肺癌
2) 形態(tài):懸浮和松散貼壁
3) 含量:>1x10^6 細(xì)胞數(shù)
4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5) 用途:僅供科研使用。
運輸和保存:
干冰運輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細(xì)胞有污染,,請立即與我們聯(lián)系。
(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作,。
細(xì)胞接收后的注意事項:
1)收到細(xì)胞后,,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損,、有液溢出及細(xì)胞有污染,,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),,同時給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù),。
3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況,。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下,,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完培6-8mL,,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上,,可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理,。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收,。
4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完培來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 ,。
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基 87%
優(yōu)質(zhì)胎牛血清 10%
GlutaMAX-1谷氨/酰胺 1%
Sodium Pyruvate丙酮酸鈉 1%
P/S青霉/素-鏈霉/素 1%
注意: 該細(xì)胞參考傳代周期:4-6天,參考換液頻率:每2-3天換1次液,傳代時可以輕輕拍打細(xì)胞培養(yǎng)瓶側(cè)面十余次,,將懸浮的細(xì)胞進(jìn)行收集離心,以40萬~50萬/ mL的密度重懸傳代,。輕輕拍打后顯微鏡下觀察仍貼壁未懸浮的細(xì)胞量多的話可以繼續(xù)拍打重復(fù)收集,,細(xì)胞量很少的則丟棄,不收集傳代,。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3) 凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。
細(xì)胞處理:
1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入到含4-6mL完培的離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,,完培重懸細(xì)胞,。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完培的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度,。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
SHP-77 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞(STR鑒定)
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