大鼠肺小動脈內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品名稱 ：大鼠肺小動脈內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品貨號 ：YLK-XB1289h
組織來源 ：肺小動脈組織
產(chǎn)品規(guī)格 ：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
細(xì)胞簡介：
肺小動脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自肺小動脈組織,；肺動脈干是短而粗的動脈，自右心室的動脈圓錐起始,，向左后上方斜升,，先在升主動脈根部的前面，繼而至其左側(cè),，至主動脈弓的下方,，約在第5胸椎高度，分為左,、右肺動脈,。左肺動脈較短，橫行向左,，經(jīng)左主支氣管前方至左肺門,，分兩支進(jìn)入左肺的上、下葉,。右肺動脈較長,，橫行向右，經(jīng)主動脈升部和上腔靜脈的后方達(dá)右肺門,，分3支進(jìn)入右肺上,、中、下葉,。左,、右肺動脈的各分支在肺實(shí)質(zhì)內(nèi)又反復(fù)分支，與支氣管的分支伴行,，最后達(dá)肺泡壁,，形成稠密的毛細(xì)血管網(wǎng)。
肺動脈輸送的是含二氧化碳較多的靜脈血,。在肺動脈干分叉處稍左側(cè)與主動脈弓下緣之間有一結(jié)締組織索,，稱動脈韌帶。管徑在0.3～1m m 之間,，為小動脈（sm all-artery）,，小動脈包括粗細(xì)不等的幾級分支，也屬肌性動脈,。較大的小動脈,，內(nèi)膜有明顯的內(nèi)彈性膜，中膜有幾層平滑肌,，外膜厚度與中膜相近,，一般沒有外彈性膜?？趶皆?m m 以下的動脈,，管壁有完整的平滑肌層及少量的彈性纖維和膠質(zhì)纖維,。小動脈是決定周圍循環(huán)阻力大小的主要因素，也是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“總開關(guān)",。典型的小動脈,，其管壁的厚度與管徑相比約為1∶2。中膜的肌層相對比其他動脈為厚,，當(dāng)平滑肌在神經(jīng)支配下強(qiáng)力收縮時,，其管腔可以wan全閉塞，而使血液不能流入它所分布的毛細(xì)血管內(nèi),，從而增加了周圍血液循環(huán)的阻力,。如果有許多小動脈同時收縮,，可使血壓顯著上升,。反之，當(dāng)小動脈的平滑肌舒張時,，則可使大量的血液流入毛細(xì)血管,，外周阻力明顯下降，血壓降低,。
終末小動脈(terminalarteri-ole)的口徑為20～30μm ,；后小動脈(m etar-teriole)，又稱毛細(xì)血管前小動脈(p recapil-lary arte riole)的口徑為12～15μm ,。管壁內(nèi)均有較稀疏的平滑肌,，在毛細(xì)血管前小動脈分支的起始部分，管壁平滑肌成分增厚,，叫做毛細(xì)血管前括約肌(precapillary sphin c-ter),，其收縮或舒張，可調(diào)節(jié)真毛細(xì)血管的血流量,，是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“分開關(guān)",。支配小動脈平滑肌的交感神經(jīng)纖維，可延伸到終末小動脈和后小動脈的平滑肌細(xì)胞,。在毛細(xì)血管前括約肌上交感神經(jīng)纖維特別豐富,。肺小動脈內(nèi)皮細(xì)胞呈單層多角形鋪路石狀分布，該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡,、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì),、維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡中起重要作用。
質(zhì)量檢測
優(yōu)利科生物實(shí)驗室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有H IV -1、H BV ,、H C V ,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息
包被條件 ： PLL（0.1m g/ml）,，明膠（0.1%）
培 養(yǎng) 基 ： 基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含F(xiàn)BS,、EG F,、bFG F、IG F,、V EG F,、H eparin、H ydrocor
tisone,、P enicillin,、Streptom ycin等
換液頻率 ： 每2-3天換液一次
生長特性 ： 貼壁
細(xì)胞形態(tài) ： 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 ： 可傳2-3代
傳代比例 ： 1:2
消 化 液 ： 0.25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 ： 氣相：空氣，95% ,；C O2,，5%
該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài),。
客戶收到細(xì)胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜，放入37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃溫浴1-3min,。倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml完培終止消化,。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL，置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液,，1000rpm,，離心5min，保留沉淀,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化,。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清，用5ml完培基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi),。
4) 待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理,。
4. 細(xì)胞實(shí)驗
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實(shí)驗器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,，避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗,。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）,，依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被,。
注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，胰/酶消化時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決。
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