大鼠腓腸肌細(xì)胞
產(chǎn)品名稱 ：大鼠腓腸肌細(xì)胞
產(chǎn)品貨號(hào) ：YLK-XB1280h
組織來源 ：骨骼肌組織
產(chǎn)品規(guī)格 ：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
腓腸肌細(xì)胞分離自小腿肌肉組織；腓腸肌位于小腿后面的皮下,，是一個(gè)淺表的肌肉,，當(dāng)人體站立時(shí)，可以在小腿后面看到隆起肌肉的輪廓就是腓腸肌,。腓腸肌為小腿后側(cè)群淺組肌肉,，有內(nèi)、外二頭,，內(nèi)側(cè)頭起自股骨內(nèi)側(cè)髁上的三角形隆起,，外側(cè)頭起自股骨外側(cè)髁的近側(cè)端，在二頭的深面各有一滑膜囊,。
腓腸肌的二肌腹增大,，在腘窩下角彼此鄰近，所成夾角多為25°～30°,，此肌下行與比目魚肌移行為跟腱,，止于跟骨結(jié)節(jié)。腓腸肌的動(dòng)脈發(fā)自腘動(dòng)脈,、靜脈與動(dòng)脈伴行,，注入腘靜脈或小隱靜脈。腓腸肌的神經(jīng)全部來自脛神經(jīng),。包括內(nèi),、外側(cè)肌神經(jīng)。腓腸肌在行走及站立時(shí)能提足跟向上,，直立時(shí),，腓腸肌和比目魚肌都參加強(qiáng)固膝關(guān)節(jié)，并調(diào)節(jié)小腿和足的位置,。脛前皮膚缺損或深部竇道及瘢痕,，可以切取腓腸肌內(nèi)側(cè)頭及其皮面皮膚所形成的肌皮瓣向前旋轉(zhuǎn)。腓腸肌還可影響足的縱弓,，該肌癱瘓或wei縮時(shí)，足縱弓將加深,。該肌由脛神經(jīng)支配,，股骨髁上骨折時(shí)，因腓腸肌收縮遠(yuǎn)側(cè)端常自后移位。腓腸肌是脛骨和腓骨后面的一塊肌肉,。腓腸肌細(xì)胞屬于骨骼肌細(xì)胞的一種,，骨骼肌又稱橫紋肌，肌肉中的一種,，約占全身重量的40% ,。骨骼肌纖維為長(zhǎng)柱形的多核細(xì)胞，肌膜的外面有基膜緊密貼附,。屬于橫紋肌,，橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌，其中骨骼肌主要分布于四肢,。每塊肌肉都是具有一定形態(tài),、結(jié)構(gòu)和功能的器官，有豐富的血管,、淋巴分布,，在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張，進(jìn)行隨意運(yùn)動(dòng),。肌肉可根據(jù)共形狀,、大小、位置,、起止點(diǎn),、纖維方向和作用等命名。
依形態(tài)命名的如斜方肌,、菱形肌,、三角肌、梨狀肌等,。骨骼肌細(xì)胞呈纖維狀,，不分支，有明顯橫紋,，核很多,，且都位于細(xì)胞膜下方。肌 細(xì)胞內(nèi)有許多沿細(xì)胞長(zhǎng)軸平行排列的細(xì)絲狀肌原纖維,。每一肌原纖維都有相間排列的明帶(Ⅰ帶)及暗帶(A 帶),。明帶染色較淺，而暗帶染色較深,。暗帶中間有一條較明亮的線稱H 線,。H 線的中部有一M 線。明帶中間,，有一條較暗的線稱為Z線,。兩個(gè)Z線之間的區(qū)段,，叫做一個(gè)肌節(jié)。骨骼肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,，可見細(xì)胞貼壁伸展,，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形,、不規(guī)則形,、三角形或扇形，核卵圓形,、居中,；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,，胞漿豐富,，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),，高低起伏,；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時(shí),，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,，4-6天即可匯合,，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。
質(zhì)量檢測(cè)
優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有H IV -1、H BV ,、H C V ,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息
包被條件 ： PLL(0.1m g/ml)
培 養(yǎng) 基 ： 含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptom ycin等
換液頻率 ： 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 ： 貼壁
細(xì)胞形態(tài) ： 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 ： 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例 ： 1:2
消 化 液 ： 0.25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 ： 氣相：空氣,，95% ,；C O2，5%
該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài),。
客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液,，37℃溫浴1-3min,。倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后,，再加入5ml完培終止消化,。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,，置于37℃、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
4) 待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培,。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm,，離心5min,，保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化,。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,，用5ml完培基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),。
4) 待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
5) 原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理,。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí),，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,，避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn),。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）,，依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被,。
注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請(qǐng)注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，胰/酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通,。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,，詳盡告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決,。
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