大鼠嗅球細胞
產品名稱 :大鼠嗅球細胞
產品貨號 :YLK-XB1272h
組織來源 :嗅球組織
產品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
細胞簡介:
嗅球細胞分離自嗅球組織;嗅球是脊椎動物前腦結構中參與嗅覺的部分,,用于感知氣味,。嗅球分為二個不同的結構:主嗅球及輔助嗅球。在大腦額葉來自許多嗅細胞的神經纖維纏集在一起,,形成線球狀的部分,。在這里,纖維與多個次級神經元——僧帽細胞的樹突相連接,,進而由這里伸出神經纖維形成嗅囊,,終止于額葉下方。
一般認為它在嗅味的辨別中具有重要的功能,。對于大部份的脊椎動物而言,,嗅球位在大腦的最前面,不過人的嗅球位于大腦的內部,。嗅球由篩骨的篩板固定且保護嗅球,,哺乳動物的篩板會分隔嗅球和嗅上皮,而嗅神經會穿過篩板中的篩孔而連接到嗅球,。嗅球分為二個不同的結構:主嗅球及輔助嗅球,。
質量檢測
優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有H IV -1,、H BV 、H C V ,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息
包被條件 : PLL(0.1m g/ml)
培 養(yǎng) 基 : 含B-27 Supplem ent,、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 : 每2天半量換液1次
生長特性 : 貼壁
細胞形態(tài) : 神經元細胞樣
傳代特性 : 不傳代,,不增值,,存活1-2周
傳代比例 : 不傳代
消 化 液 : 0.25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 : 氣相:空氣,95% ,;C O2,,5%
該細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài),。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,,用75%酒精消毒瓶身,,拆下封口膜,放入37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min,。倒置顯微鏡下觀察,,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化,。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,,置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液,,1000rpm,,離心5min,保留沉淀,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),。消化完向離心管內加入5ml完培終止消化,。
3) 經1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,,接種于新的培養(yǎng)瓶內,。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱),。
5) 原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片,、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,,需要對實驗器皿進行包被,,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗,。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),,依據細胞種類而定,。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,,胰/酶消化時間不宜過長,,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,,記錄細胞狀態(tài),,便于和公司技術部溝通,。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況,,請及時和我們聯系,,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決。