大鼠頸動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞
產(chǎn)品名稱 ：大鼠頸動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞
產(chǎn)品貨號(hào) ：YLK-XB1267h
組織來(lái)源 ：頸動(dòng)脈組織
產(chǎn)品規(guī)格 ：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
頸動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞分離自頸動(dòng)脈組織；頸動(dòng)脈存在于脊椎動(dòng)物頸部的動(dòng)脈,。有頸外動(dòng)脈和頸內(nèi)動(dòng)脈,。前者分布至頭頂部和顏面部。后者進(jìn)入顱內(nèi)分布至腦和眼眶內(nèi)。在發(fā)生時(shí),，鰓弓中不形成鰓的下頜弓,，所以，從大動(dòng)脈也不分入鰓動(dòng)脈和出鰓動(dòng)脈,。從腹大動(dòng)脈的前方發(fā)出頸外動(dòng)脈,，頸內(nèi)動(dòng)脈是通向第三鰓弓的血管延伸而形成的，但在某些魚類,、有尾兩棲類和爬行類中,，這一血管也將一些血液送至大動(dòng)脈根。其它的高等脊椎動(dòng)物的大動(dòng)脈根,，在第三,、第四大動(dòng)脈弓之間消失，所以,，其第三大動(dòng)脈弓形成純粹的頸動(dòng)脈,。在相當(dāng)于第三、第四大動(dòng)脈弓之間的腹行大動(dòng)脈的部分稱為頸總動(dòng)脈干(com m on co-rotid trunk),；高等脊椎動(dòng)物,，是由頸總動(dòng)脈干分為左、右頸總動(dòng)脈,，然后再各分支為頸外動(dòng)脈和頸內(nèi)動(dòng)脈,。
頸動(dòng)脈是將血液由心臟輸送至頭、面,、頸部的大血管,，是腦的主要供血血管之一，由內(nèi)膜,、平滑肌層及外膜層構(gòu)成,。與其相關(guān)常見(jiàn)疾病為頸動(dòng)脈狹窄，頸動(dòng)脈狹窄導(dǎo)致的缺血癥狀主要包括,，頭暈,、記憶力、定向力減退,、意識(shí)障礙,、黑朦、偏側(cè)面部和/或肢體麻木和/或無(wú)力,、伸舌偏向,、言語(yǔ)不利、不能聽懂別人說(shuō)的話等,。研究頸動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng),，為研究治療頸動(dòng)脈狹窄提供一個(gè)細(xì)胞模型具有重要意義,。
質(zhì)量檢測(cè)
優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有H IV -1,、H BV 、H C V ,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 ： 培養(yǎng)基 含F(xiàn)BS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptom ycin等
換液頻率 ： 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 ： 貼壁
細(xì)胞形態(tài) ： 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 ： 可傳3代左右
傳代比例 ： 1:2
消 化 液 ： 0.25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 ： 氣相：空氣,，95% ；C O2,，5%
該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài),。
客戶收到細(xì)胞后,，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜，放入37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃溫浴1-3min,。倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后,，再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,，置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
4) 待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培,。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液,，1000rpm,，離心5min,，保留沉淀,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化,。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清，用5ml完培基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),。
4) 待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱),。
5) 原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理,。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí)，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,，避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn)。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定,。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被,。
注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,，胰/酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,，詳盡告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問(wèn)題得到解決,。
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