大鼠外周血淋巴細(xì)胞
產(chǎn)品名稱 ：大鼠外周血淋巴細(xì)胞
產(chǎn)品貨號(hào) ：YLK-XB1266h
組織來(lái)源 ：血液組織
產(chǎn)品規(guī)格 ：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
外周血淋巴細(xì)胞分離自外周血,；外周血是除骨髓之外的血液,，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,，在二十一世紀(jì)初人類開(kāi)始的生命方舟計(jì)劃中首ci提出外周血這一新概念。淋巴細(xì)胞(lym phocyte)是白細(xì)胞的一種,，是體積最小的白細(xì)胞,。
其由淋巴器官產(chǎn)生，主要存在于淋巴管中循環(huán)的淋巴液中,，是機(jī)體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分,，是淋巴系統(tǒng)幾乎全部免疫功能的主要執(zhí)行者，是對(duì)抗外界感染和監(jiān)控體內(nèi)細(xì)胞變異的一線“士兵",。淋巴細(xì)胞是一類具有免疫識(shí)別功能的細(xì)胞系,，按其發(fā)生遷移、表面分子和功能的不同,，可分為T 淋巴細(xì)胞(又名T 細(xì)胞),、B淋巴細(xì)胞(又名B細(xì)胞)和自然殺傷(N K )細(xì)胞。T細(xì)胞和B細(xì)胞都是抗原特異性淋巴細(xì)胞,，它們的最初來(lái)源是相同的,，都來(lái)自造血組織。T淋巴細(xì)胞隨血循環(huán)到胸腺,，在胸腺激素等的作用下成熟,，而B(niǎo)細(xì)胞在骨髓中分化成熟。
當(dāng)受抗原刺激后,，T淋巴細(xì)胞即轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞,，再分化為致敏T淋巴細(xì)胞，參與細(xì)胞免疫,，其免疫功能主要是抗胞內(nèi)感染,、瘤細(xì)胞與異體細(xì)胞等；而B(niǎo)淋巴細(xì)胞是先轉(zhuǎn)化為漿母細(xì)胞,，再分化為漿細(xì)胞,，產(chǎn)生并分泌免疫球蛋白(抗體)，參與體液免疫,，其功能是產(chǎn)生抗體,，提呈抗原，以及分泌細(xì)胞內(nèi)因子參與免疫調(diào)節(jié),；N K 細(xì)胞不依賴抗原刺激而自發(fā)地發(fā)揮細(xì)胞毒效應(yīng),，具有殺傷靶細(xì)胞的作用,。
質(zhì)量檢測(cè)
優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有H IV -1,、H BV 、H C V ,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 ： 含F(xiàn)BS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptom ycin等
換液頻率 ： 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 ： 懸浮 細(xì)胞形態(tài) 圓形
細(xì)胞形態(tài) ： 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 ： 不增殖,；不傳代
傳代比例 ： 不傳代
消 化 液 ： 0.25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 ： 氣相：空氣，95% ,；C O2,，5%
該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
客戶收到細(xì)胞后,，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液,，37℃溫浴1-3min,。倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后,，再加入5ml完培終止消化,。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
4) 待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培,。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液,，1000rpm，離心5min,，保留沉淀,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,，用5ml完培基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
5) 原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理,。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí),，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,，避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn),。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）,，依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被,。
注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,，胰/酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問(wèn)題得到解決。
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