大鼠胰腺腺泡細(xì)胞
產(chǎn)品名稱 :大鼠胰腺腺泡細(xì)胞
產(chǎn)品貨號(hào) :YLK-XB1231h
組織來源 :腦組織
產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
胰腺腺泡細(xì)胞分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分,。外分泌腺由腺泡和腺管組成,,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道,。胰液中含有碳酸/氫鈉,、胰蛋白/酶原、脂肪酶,、淀粉/酶等,。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質(zhì),、脂肪和糖的作用,。
內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成,胰島主要由4種細(xì)胞組成:α細(xì)胞,、β細(xì)胞,、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素,,升高血糖,;β細(xì)胞分泌胰島素,降低血糖,;γ細(xì)胞分泌生長/抑素,,以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌,;PP細(xì)胞分泌胰多肽,,抑制胃腸運(yùn)動(dòng)、胰液分泌和膽囊收縮,。胰腺泡主要由錐體形的腺泡細(xì)胞組成,,與閏管相連,,外有基膜,為典型的蛋白質(zhì)分泌細(xì)胞,。
胰腺泡可分泌多種消化酶,,如胰蛋白/酶原、胰糜蛋白/酶原,、胰淀粉/酶,、胰脂肪酶、D N A 酶和RN A 酶等,,分別消化食物中的營養(yǎng)成分,;胰腺泡也分泌胰蛋白/酶抑制因子,防止兩種蛋白酶原被激活,,腺泡腔內(nèi)有泡心細(xì)胞,,扁平或立方形,色淺,,是閏管起始部的上皮細(xì)胞,,為胰腺腺泡的特點(diǎn)。
質(zhì)量檢測(cè)
優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有H IV -1、H BV ,、H C V ,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 : 含F(xiàn)BS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長特性 : 圓形
細(xì)胞形態(tài) : 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 : 不增殖,;不傳代
傳代比例 : 不傳代
消 化 液 : 0.25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 : 氣相:空氣,,95% ;C O2,,5%
該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài),。
客戶收到細(xì)胞后,,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,,拆下封口膜,,放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,,37℃溫浴1-3min,。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,,再加入5ml完培終止消化,。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,,然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,,置于37℃、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培,。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,,離心5min,,保留沉淀,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,,重懸沉淀,,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化,。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,,用5ml完培基重懸沉淀,,接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),。
4) 待細(xì)胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
5) 原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理,。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),,需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn),。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),,依據(jù)細(xì)胞種類而定,。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。
注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,,請(qǐng)注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,,胰/酶消化時(shí)間不宜過長,,否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,,記錄細(xì)胞狀態(tài),,便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,,以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決。