大鼠外周血中性粒細(xì)胞
產(chǎn)品名稱 ：大鼠外周血中性粒細(xì)胞
產(chǎn)品貨號 ：YLK-XB1207h
組織來源 ：外周血
產(chǎn)品規(guī)格 ：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
細(xì)胞簡介：
外周血中性粒細(xì)胞分離自外周血,。外周血是除骨髓之外的血液,，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中首ci提出外周血這一新概念。白細(xì)胞是一類無色,、球形,、有核的血細(xì)胞。白細(xì)胞不是一個均一的細(xì)胞群,，根據(jù)其形態(tài),、功能和來源部位可以分為三大類 ：粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞,，其中粒細(xì)胞又可根據(jù)胞質(zhì)中顆粒的染色性質(zhì)不同,，分為中性粒細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞和嗜堿粒細(xì)胞三種,。
中性粒細(xì)胞是在瑞氏(W right) 染色血涂片中,，胞質(zhì)呈無色或極淺的淡紅色，有許多彌散分布的細(xì)小的(0. 2～0. 4微米) 淺紅或淺紫色的te有顆粒,。細(xì)胞核呈桿狀或2～5分葉狀,，葉與葉間有細(xì)絲相連。中性粒細(xì)胞具趨化作用、吞噬作用和殺菌作用,。中性粒細(xì)胞來源于骨髓,，具有分葉形或桿狀的核，胞漿內(nèi)含有大量既不嗜堿也不嗜酸的中性細(xì)顆粒,。這些顆粒多是溶酶體,，內(nèi)含髓過氧化酶、溶菌/酶,、堿性磷酸酶和酸性水解酶等豐富的酶類,，與細(xì)胞的吞噬和消化功能有關(guān)。
中性粒細(xì)胞在血液的非特異性免疫中起著十分重要的作用,，它處于機(jī)體抵御微生物病原體,，特別是在化膿性細(xì)菌入侵的第一線，具有很強(qiáng)的吞噬活性,，可吞噬細(xì)菌,、衰老的紅細(xì)胞、抗原一抗體復(fù)合物和壞死的細(xì)胞等,。中性粒細(xì)胞內(nèi)含有大量溶酶體酶,，因此能將吞噬入細(xì)胞內(nèi)的細(xì)菌和組織碎片徹di分解。當(dāng)中性粒細(xì)胞吞噬數(shù)十個細(xì)菌后,，自身發(fā)生解體,，所釋出的各種溶酶體酶類能溶解周圍組織而形成膿液。中性粒細(xì)胞是人體內(nèi)壽命最短的細(xì)胞,，一般體外培養(yǎng)12-24h內(nèi)活性穩(wěn)定,，48h活性下降，96h基本死亡,。
質(zhì)量檢測
優(yōu)利科生物實驗室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有H IV -1,、H BV ,、H C V 、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 ：含F(xiàn)BS,、生長添加劑,、Penicillin,、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：懸浮
細(xì)胞形態(tài) ：圓形
傳代特性 ：不增殖,。不傳代
傳代比例 ：不傳代
消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 ：氣相 ：空氣，95% 。C O2,，5%
該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài),。
客戶收到細(xì)胞后,，請按照以下方法進(jìn)行操作
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜,，放入37℃、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細(xì)胞一次,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余胰蛋白/酶消化液,，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后,，再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL，置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液,，1000rpm,，離心5min，保留沉淀,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化,。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,，用5ml完培基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi),。
4) 待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱),。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理,。
4. 細(xì)胞實驗
因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進(jìn)行包被,，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,，避免細(xì)胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定,。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被,。
注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰/酶消化時間不宜過長,，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和公司技術(shù)部溝通,。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決,。
4
化工儀器網(wǎng)