大鼠前列腺干細胞
產品名稱 :大鼠前列腺干細胞
產品貨號 :YLK-XB1201h
組織來源 :前列腺組織
產品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
細胞簡介:
前列腺干細胞分離自前列腺組織。前列腺(Prostate) 是雄性te有的性腺器官,。前列腺是不成對的實質性器宮,,由腺組織和肌組織構成。前列腺如栗子,,底朝上,,與膀胱相貼,尖朝下,,抵泌尿生殖膈,,前面貼恥骨聯(lián)合,,后面依直腸,。前列腺腺體的中間有尿道穿過,扼守著尿道上口,,所以,,前列腺有問題時,排尿首先受影響,。前列腺是機體非常少有的,,具有內、外雙重分泌功能的性分泌腺,。作為外分泌腺,,前列腺每天分泌前列腺液,是構成精液主要成分,。作為內分泌腺,,前列腺分泌的激素稱為“前列腺素"。
質量檢測
優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經Vim entin免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有H IV -1、H BV ,、H C V ,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 :含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態(tài) :長梭形
傳代特性 :可傳3代左右
傳代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,,95% 。C O2,,5%
該細胞體外培養(yǎng)周期有限,。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài),。
客戶收到細胞后,,請按照以下方法進行操作
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,,拆下封口膜,,放入37℃、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細胞一次,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,,吸出多余胰蛋白/酶消化液,,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,,待細胞回縮變圓后,,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液,,1000rpm,,離心5min,保留沉淀,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,,重懸沉淀,,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內加入5ml完培終止消化,。
3) 經1000rpm離心5min丟棄上清,,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內,。
4) 待細胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱),。
5) 原瓶內貼壁細胞按正常消化處理,。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿(如玻璃爬片,、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,,以增強細胞貼壁性,,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),,明膠(0.1%),依據細胞種類而定,。懸浮/半懸浮細胞無需包被,。
注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,,胰/酶消化時間不宜過長,,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片,,記錄細胞狀態(tài),,便于和公司技術部溝通。由于運輸的原因,,個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況,,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,,以便我們的技術人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決。