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目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司>>科研細胞>>原代細胞>> 復(fù)蘇/凍存大鼠角膜基質(zhì)細胞

大鼠角膜基質(zhì)細胞
  • 大鼠角膜基質(zhì)細胞
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 品牌 YLKBIO
  • 型號 復(fù)蘇/凍存
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市
屬性

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更新時間:2024-07-10 16:40:24瀏覽次數(shù):408評價

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5*10^5
貨號 YLK-XB1192h 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 科研 組織來源 眼角膜組織
大鼠角膜基質(zhì)細胞分離自眼角膜組織,。角膜位于眼球前壁的一層透明膜,約占纖維膜的前1/6,,從后面看角膜呈正圓形,,從前面看為橫橢圓形,。角膜厚度各部分不盡相同,,中央部最薄,。

大鼠角膜基質(zhì)細胞

產(chǎn)品名稱 :大鼠角膜基質(zhì)細胞

產(chǎn)品貨號 :YLK-XB1192h

組織來源 :眼角膜組織

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶


細胞簡介:

角膜基質(zhì)細胞分離自眼角膜組織,。角膜位于眼球前壁的一層透明膜,,約占纖維膜的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,,從前面看為橫橢圓形,。角膜厚度各部分不盡相同,中央部最薄,。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢,,如有外物接觸角膜,眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛,。為了保持透明,,角膜并沒有血管,透過外界空氣,、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣,。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細胞層,、前彈力層,、基質(zhì)層、后彈力層,、內(nèi)皮細胞層,。

角膜基質(zhì)層是角膜的主要組成部分,占據(jù)角膜厚度的90% ,,由角膜基質(zhì)細胞,、膠原纖維和細胞外基質(zhì)構(gòu)成。角膜基質(zhì)層缺損的修復(fù)主要由角膜基質(zhì)細胞的增殖及分泌細胞外基質(zhì)完成,。角膜基質(zhì)層具有結(jié)構(gòu)規(guī)整,,透明度高的特點,正常情況下角膜基質(zhì)細胞分泌組成基質(zhì)層的成分,,維持角膜的透明度,,此細胞對于角膜損傷的修復(fù)具有重要意義,。角膜基質(zhì)細胞,,存在于角膜基質(zhì)層中,在正常情況下,,處于靜止狀態(tài),。但當(dāng)角膜損傷時,不同上皮來源的因子及環(huán)境信號,將影響角膜基質(zhì)細胞的應(yīng)答反應(yīng),,決定著角膜能否wan全被修復(fù)。


細胞特性
1)組織來源于實驗動物的正常眼組織,。
2)細胞鑒定:波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色為陽性,。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:長梭形細胞,,不規(guī)則細胞,,貼壁培養(yǎng)。



質(zhì)量檢測

優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有H IV -1、H BV ,、H C V ,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。


培養(yǎng)信息

培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態(tài) :梭形、多角形
傳代特性 :可傳2-3代 傳代比例 1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,,95% ,。C O2,5%

該細胞體外培養(yǎng)周期有限,。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


客戶收到細胞后,,請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,,放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。

2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min,。倒置顯微鏡下觀察,,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化,。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,,置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
4) 待細胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培,。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液,,1000rpm,離心5min,,保留沉淀,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,,用5ml完培基重懸沉淀,,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
4) 待細胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理,。
4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,,避免細胞因沒貼好影響實驗,。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),,明膠(0.1%),,依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被,。


注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通,。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,,詳盡告知細胞的具體情況,,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決,。

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