大鼠肺泡巨噬細(xì)胞
產(chǎn)品名稱 ：大鼠肺泡巨噬細(xì)胞
產(chǎn)品貨號 ：YLK-XB1181h
組織來源 ：肺組織
產(chǎn)品規(guī)格 ：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
細(xì)胞簡介：
肺泡巨噬細(xì)胞分離自肺組織。肺是機體的呼吸器官,，位于胸腔,，左右各一,，覆蓋于心之上。肺有分葉,，左二右三,，共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管,、支氣管等) 與喉,、鼻相連，故稱喉為肺之門戶,，鼻為肺之外竅,。肺泡由單層上皮細(xì)胞構(gòu)成的半球狀囊泡。肺中的支氣管經(jīng)多次反復(fù)分枝成無數(shù)細(xì)支氣管,，它們的末端膨大成囊,，囊的四周有很多突出的小囊泡，即為肺泡,。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞,，有多種功能，是研究細(xì)胞吞噬,、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象,。
巨噬細(xì)胞較易獲得，便于培養(yǎng),，并可進行純化,。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群，在條件適宜下可生活2-3周,，多用做原代培養(yǎng),，難以長期生存。巨噬細(xì)胞(M acro p h ages) 是一種位于組織內(nèi)的白血球,，源自單核細(xì)胞,，而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞,。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞,，在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫) 和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫) 。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對細(xì)胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化) ，并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞,，令其對病原體作出反應(yīng),。肺泡巨噬細(xì)胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活躍,，有重要防御功能,。肺泡是重要的巨噬細(xì)胞儲存器官，為結(jié)核病的研究提供了重要的材料,。
質(zhì)量檢測
優(yōu)利科生物實驗室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有H IV -1,、H BV ,、H C V 、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 ：含F(xiàn)BS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：貼壁
細(xì)胞形態(tài) ：巨噬細(xì)胞樣
傳代特性 ：屬于終末分化細(xì)胞,。屬于不增殖細(xì)胞群
傳代比例 ：不傳代
消 化 液 ：利多ka因(12m M )
培養(yǎng)條件 ：氣相 ：空氣，95% ,。C O2,，5%
該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài),。
客戶收到細(xì)胞后,，請按照以下方法進行操作
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜，放入37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余胰蛋白/酶消化液,，37℃溫浴1-3min,。倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后,，再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補充新鮮的完培至5mL，置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培,。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm,，離心5min,，保留沉淀,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化,。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,，用5ml完培基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱),。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理,。
4. 細(xì)胞實驗
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進行包被,，以增強細(xì)胞貼壁性,，避免細(xì)胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定,。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被,。
注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰/酶消化時間不宜過長,，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和公司技術(shù)部溝通,。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決,。
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