大鼠視乳頭星形膠質(zhì)細胞
產(chǎn)品名稱 ：大鼠視乳頭星形膠質(zhì)細胞
產(chǎn)品貨號 ：YLK-XB1173h
組織來源 ：眼球
產(chǎn)品規(guī)格 ：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
細胞簡介：
視乳頭星形膠質(zhì)細胞分離自視神經(jīng)乳頭。視乳頭位于黃斑區(qū)鼻側(cè)附近,，境界清楚,，呈白色、圓盤狀,，因此也稱為視盤,。視網(wǎng)膜上視覺纖維在此匯集，并于此穿出眼球向視中樞傳遞,。視乳頭中央有一小凹陷區(qū),，稱為視杯或生理凹陷。視乳頭是視神經(jīng)纖維聚合組成視神經(jīng)的起始端,，它沒有視細胞,，因而沒有視覺，在視野中是生理盲點,。視乳頭是開角型青光眼最早受損的部位,，星形膠質(zhì)細胞是視神經(jīng)乳頭處主要的膠質(zhì)細胞類型,，可為視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞無髓鞘的軸突提供結(jié)構(gòu)和生物支持。
青光眼視神jing病變是全球shou位不可逆性致肓眼病,。青光眼視神jing病變以視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞軸突喪失并伴有視乳頭處細胞外基質(zhì)重坦為主要特征,。
導(dǎo)致視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞喪失的病理生理機制尚未wan全闡明，神經(jīng)膠質(zhì)細胞對調(diào)控神經(jīng)元微環(huán)境起多重作用,，越來越多的證據(jù)表明膠質(zhì)細胞町能對神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育,、損傷、修復(fù)及再生起極為關(guān)鍵的作用,。視乳頭星形膠質(zhì)細胞胞體多扁平,，體積較大，形狀多呈不規(guī)則的多邊形,，突起較粗,，胞核為橢圓形，核仁清晰可見,，核周有較密集物質(zhì),，胞質(zhì)稀疏，骨架結(jié)構(gòu)良好,，明顯不同于長梭形的成纖維細胞形態(tài),。
質(zhì)量檢測
優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有H IV -1、H BV ,、H C V ,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 ：含F(xiàn)BS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：貼壁
細胞形態(tài) ：梭形、多角形
傳代特性 ：可傳2-3代
傳代比例 ：1:2
消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 ：氣相 ：空氣,，95% ,。C O2，5%
該細胞體外培養(yǎng)周期有限,。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜，放入37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃溫浴1-3min,。倒置顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完培終止消化,。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的完培至5mL,，置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
4) 待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培,。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液,，1000rpm，離心5min,，保留沉淀,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,，用5ml完培基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
4) 待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實驗器皿進行包被,，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗,。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）,，依據(jù)細胞種類而定,。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，胰/酶消化時間不宜過長,，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài),，便于和公司技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決。
4
化工儀器網(wǎng)