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參考價(jià)	面議

科研細(xì)胞

細(xì)胞系

原代細(xì)胞

供貨周期	現(xiàn)貨	規(guī)格	5*10^5
貨號(hào)	YLK-XB1135h	應(yīng)用領(lǐng)域	化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途	科研	組織來源	腦動(dòng)脈組織

大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞腦動(dòng)脈為肌型動(dòng)脈,，管壁薄,，血管周圍沒有支持組織,。但腦動(dòng)脈血管內(nèi)膜厚,，有發(fā)達(dá)的內(nèi)彈力膜,。
血管新生是從原有血管系統(tǒng)的內(nèi)皮細(xì)胞增殖,、游走而形成新的子代血管分支的過程,。腦動(dòng)脈新生可以重建有效血供,，從而改善多發(fā)性,、彌漫性腦動(dòng)脈粥樣硬化所致的腦缺血,，最終預(yù)防癡呆和腦梗死發(fā)生。

詳細(xì)介紹

大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞

產(chǎn)品名稱：大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞

產(chǎn)品貨號(hào) ：YLK-XB1135h

組織來源：腦動(dòng)脈組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自腦動(dòng)脈組織,；腦動(dòng)脈有成對(duì)的頸內(nèi)動(dòng)脈和椎動(dòng)脈互相銜接成動(dòng)脈循環(huán),；靜脈系多不與同名動(dòng)脈拌行，所收集的靜脈血先進(jìn)入靜脈竇再匯入頸內(nèi)靜脈,；各級(jí)靜脈都沒有瓣膜,，它包括腦的動(dòng)脈系統(tǒng)和腦的靜脈系統(tǒng)。

腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞主要功能：①維持血管內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡,；②合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì),；③維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡。

細(xì)胞特性
1)組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的腦動(dòng)脈組織,。
2)細(xì)胞鑒定：血管假性血友病因子（vWF）免疫熒光染色為陽(yáng)性,。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：鋪路石狀細(xì)胞,，不規(guī)則細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng)。

質(zhì)量檢測(cè)

優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有H IV -1、H BV ,、H C V ,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息

包被條件： PLL(0.1mg/ml)，明膠(0.1%)

培養(yǎng) 基：含F(xiàn)BS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài) ：內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液： 0.25%胰蛋白/酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

客戶收到細(xì)胞后,，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

2. 貼壁細(xì)胞消化

1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次,。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液,，37℃溫浴1-3min,。倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后,，再加入5ml完培終止消化,。

3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,，置于37℃、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。

4) 待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培,。

3. 細(xì)胞收貨脫落

1) 收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm,，離心5min,，保留沉淀。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化,。

3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,，用5ml完培基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),。

4) 待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。

5) 原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理,。

4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí),，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,，避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn),。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2），多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）,，依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被,。

注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請(qǐng)注意保持無菌操作,。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,，胰/酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài),。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通,。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,，詳盡告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決,。