| 供貨周期 |
現貨 |
規(guī)格 |
5*10^5 |
| 貨號 |
YLK-XB1122h |
應用領域 |
化工,生物產業(yè) |
| 主要用途 |
科研 |
組織來源 |
冠狀動脈 |
大鼠冠狀動脈平滑肌細胞分離自冠狀動脈組織,。冠狀動脈是供給心臟血液的動脈，起于主動脈根部,，分左右兩支,，行于心臟表面,。采用Schlesinger等的分類原則,，將冠狀動脈的分布分為三型 ：右優(yōu)勢型,、均衡型、左優(yōu)勢型,。左右冠狀動脈是升主動脈的第一對分支,。左冠狀動脈為一短干，發(fā)自左主動脈竇,，經肺動脈起始部和左心耳之間,，沿冠狀溝向左前方行后，立即分為前室間支和旋支,。
大鼠冠狀動脈平滑肌細胞
產品名稱 ：大鼠冠狀動脈平滑肌細胞
產品貨號 ：YLK-XB1122h
組織來源 ：冠狀動脈
產品規(guī)格 ：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
細胞簡介：
冠狀動脈平滑肌細胞分離自冠狀動脈組織,。冠狀動脈是供給心臟血液的動脈,，起于主動脈根部，分左右兩支,，行于心臟表面,。采用Schlesinger等的分類原則，將冠狀動脈的分布分為三型 ：右優(yōu)勢型,、均衡型,、左優(yōu)勢型。左右冠狀動脈是升主動脈的第一對分支,。左冠狀動脈為一短干,，發(fā)自左主動脈竇，經肺動脈起始部和左心耳之間,，沿冠狀溝向左前方行后,，立即分為前室間支和旋支。
前室間支沿前室間溝下行,，旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合,。它是構成冠狀動脈壁的主要細胞成分，細胞膜上分布著多種離子通道,，如電壓依賴性N a+ 通道,、多種C a2+ 通道和K + 通道。它們參與了靜息電位的維持與細胞膜電位的復極化,、超極化,，調節(jié)血管平滑肌的收縮及舒張功能，此外動脈粥樣硬化的發(fā)展也涉及冠狀動脈平滑肌細胞增殖,、炎癥及凋亡等,。因此，原代分離培養(yǎng)的冠狀動脈平滑肌細胞,，對研究生理和病理狀態(tài)下離子通道及血管張力變化機制具有非常重要的作用,。
冠狀動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展,，細胞形態(tài)大小不一,，呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,，核卵圓形、居中,。2周后細胞匯合,，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富,，有分枝狀突起,，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,，高低起伏。細胞密度低時,，常交織成網狀,。密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細胞生長較快,，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點,。
質量檢測
優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經Vim entin免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有H IV -1,、H BV ,、H C V 、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 ：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：貼壁
細胞形態(tài) ：成纖維細胞樣
傳代特性 ：可傳5代左右,。3代以內狀態(tài)最佳
傳代比例 ：1:2
消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 ：氣相 ：空氣,，95% 。C O2,，5%
該細胞體外培養(yǎng)周期有限,。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài),。
客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜,，放入37℃、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余胰蛋白/酶消化液,，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后,，再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補充新鮮的完培至5mL，置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液,，1000rpm,，離心5min，保留沉淀,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),。消化完向離心管內加入5ml完培終止消化,。
3) 經1000rpm離心5min丟棄上清，用5ml完培基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內,。
4) 待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱),。
5) 原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實驗器皿進行包被,，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗,。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）,，依據細胞種類而定,。懸浮/半懸浮細胞無需包被,。
注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰/酶消化時間不宜過長,，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài),，便于和公司技術部溝通,。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決,。
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