大鼠心肌細(xì)胞
產(chǎn)品名稱 ：大鼠心肌細(xì)胞
產(chǎn)品貨號 ：YLK-XB1117h
組織來源 ：心臟組織
產(chǎn)品規(guī)格 ：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
細(xì)胞簡介：
心肌細(xì)胞分離自心臟組織,。心臟是脊椎動物身體中最重要的一個器官,，主要功能是為血液流動提供壓力，把血液運行至身體各個部分,。心臟由心肌構(gòu)成,，左心房、左心室,、右心房,、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,，故互不相通,，心房與心室之間有瓣膜(房室瓣) ，這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,，而不能倒流,。
心臟的作用是推動血液流動，向器官,、組織提供充足的血流量,，以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì),，并帶走代謝的終產(chǎn)物(如二氧化碳,、無機鹽、尿素和尿酸等) ,，使細(xì)胞維持正常的代謝和功能,。心肌細(xì)胞呈菱形,、多邊形等不規(guī)則形狀。細(xì)胞培養(yǎng)2h后開始貼壁,，呈梭形,。到12h左右，細(xì)胞開始伸出偽足,，呈菱形,、多角形。細(xì)胞分離培養(yǎng)48h以后,，大部分伸出偽足,、呈巴掌狀，部分心肌細(xì)胞會出現(xiàn)搏動,。心肌細(xì)胞為終末分化細(xì)胞,，在體外不增殖。體外培養(yǎng)的心肌細(xì)胞可保持結(jié)構(gòu)及功能上的某些特點,，并具有自發(fā)性節(jié)律搏動,，且心肌細(xì)胞的培養(yǎng)具有簡便、定量,、重復(fù)性好以及不受神經(jīng)體液因素的影響等特點,。
利用培養(yǎng)的心肌細(xì)胞在探索非血液動力學(xué)因素所致的心肌肥厚的調(diào)節(jié)，研究心肌細(xì)胞的生物力學(xué),、凋亡,、受體下調(diào)、缺血預(yù)處理,、信號通路,、對作用于心臟的新藥進行篩選并對其安全性進行評價以及從培養(yǎng)的心肌細(xì)胞中提取有價值的生物因子等方面具有廣闊的應(yīng)用前景，對于研究其生理功能,、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。
細(xì)胞特性
1)組織來源于實驗動物的正常心臟組織。本細(xì)胞為終末分化細(xì)胞,，增殖能力很弱,，建議客戶收到細(xì)胞后直接用于后續(xù)實驗，不要進行擴增培養(yǎng),。
2)細(xì)胞鑒定：肌球蛋白重鏈(MHC)免疫熒光染色為陽性,。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌,。
5)細(xì)胞生長方式：長柱狀細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng),。
質(zhì)量檢測
優(yōu)利科生物實驗室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有H IV -1,、H BV 、H C V ,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息
包被條件 ：PLL(0. 1m g/ml)
培 養(yǎng) 基 ：含F(xiàn)BS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：貼壁
細(xì)胞形態(tài) ：梭形,、多角形
傳代特性 ：屬于終末分化細(xì)胞。屬于不增殖細(xì)胞群
傳代比例 ：不傳代
消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 ：氣相 ：空氣,，95% ,。C O2，5%
該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
客戶收到細(xì)胞后,，請按照以下方法進行操作
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液,，37℃溫浴1-3min,。倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml完培終止消化,。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補充新鮮的完培至5mL,，置于37℃、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
4) 待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液,，1000rpm,，離心5min，保留沉淀,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化,。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,，用5ml完培基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱),。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理,。
4. 細(xì)胞實驗
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進行包被,，以增強細(xì)胞貼壁性,，避免細(xì)胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定,。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被,。
注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰/酶消化時間不宜過長,，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和公司技術(shù)部溝通,。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決,。
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