大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品名稱 :大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品貨號 :YLK-XB1076h
組織來源 :腸組織
產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
細(xì)胞簡介:
腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自腸靜脈。腸道指的是從胃幽門至肛men的消化管,。腸是消化管中最長的一段,,也是功能最重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸,、大腸和直腸3大段,。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進行的,大腸主要濃縮食物殘渣,,形成糞便,,再通過直腸經(jīng)肛men排出體外。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化,、吸收食物,以提供足夠的養(yǎng)分,,其實它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機體內(nèi)最大的微生態(tài)系統(tǒng),。
質(zhì)量檢測
優(yōu)利科生物實驗室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有H IV -1,、H BV 、H C V ,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息
包被條件 :PLL(0. 1m g/ml) ,,明膠(0. 1%)
培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS、生長添加劑,、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細(xì)胞形態(tài) :內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 :可傳2-3代
傳代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,,95% ,。C O2,,5%
該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
客戶收到細(xì)胞后,,請按照以下方法進行操作
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,,放入37℃、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細(xì)胞一次,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min,。倒置顯微鏡下觀察,,待細(xì)胞回縮變圓后,,再加入5ml完培終止消化,。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,,置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
4) 待細(xì)胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培,。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液,,1000rpm,離心5min,,保留沉淀,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化,。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi),。
4) 待細(xì)胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理,。
4. 細(xì)胞實驗
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,,需要對實驗器皿進行包被,以增強細(xì)胞貼壁性,,避免細(xì)胞因沒貼好影響實驗,。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),,明膠(0.1%),,依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被,。
注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通,。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決,。