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目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司>>科研細(xì)胞>>原代細(xì)胞>> 復(fù)蘇/凍存小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞

小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞
  • 小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌 ATCC
  • 型號(hào) 復(fù)蘇/凍存
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市
屬性

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更新時(shí)間:2024-07-09 18:49:18瀏覽次數(shù):377評(píng)價(jià)

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5*10^5
貨號(hào) YLK-XB0814h 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 科研 組織來源 腦組織
小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自腦組織,。腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞是血腦屏障的主要組成成分,,它是組成腦微血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞,能夠限制可溶性物質(zhì)和細(xì)胞等從血液進(jìn)入大腦,,大腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞與外周內(nèi)皮細(xì)胞相比具有一些相同特性,。

小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞

產(chǎn)品名稱 :小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞

產(chǎn)品貨號(hào) :YLK-XB0814h

組織來源 :腦組織

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶


細(xì)胞簡(jiǎn)介:

腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自腦組織,。腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞是血腦屏障的主要組成成分,,它是組成腦微血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞,能夠限制可溶性物質(zhì)和細(xì)胞等從血液進(jìn)入大腦,,大腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞與外周內(nèi)皮細(xì)胞相比具有一些相同特性,。它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對(duì)維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓,、抗血栓形成等有重要作用,,在腦血管疾病的發(fā)病機(jī)制中有重要病理生理學(xué)意義。與外周內(nèi)皮細(xì)胞相同,,大腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞表面表達(dá)細(xì)胞粘附分子,,調(diào)控白細(xì)胞進(jìn)入大腦。由于微血管內(nèi)皮細(xì)胞的器官特異性,,內(nèi)皮細(xì)胞通常取源于疾病研究的相關(guān)組織,。

其主要特征如下:
① 腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞存在許多細(xì)胞間緊密連接,產(chǎn)生很高的跨內(nèi)皮阻抗,,延遲細(xì)胞旁的通量,。
② 腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞缺乏內(nèi)皮細(xì)胞的窗孔結(jié)構(gòu),其液相物質(zhì)胞飲水平較低,。

③ 腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞具有不對(duì)稱定位酶和載體介導(dǎo)轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng),,從而產(chǎn)生“兩極分化"的表現(xiàn)型。


細(xì)胞特性

包被條件 :PLL(0. 1m g/ml) ,,明膠(0. 1%)
培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 :貼壁
細(xì)胞形態(tài) :內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 :可傳2-3代
傳代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白/酶

培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,,95% 。C O2,5%


質(zhì)量檢測(cè)

優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有H IV -1、H BV ,、H C V ,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。


培養(yǎng)信息

培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 :貼壁
細(xì)胞形態(tài) :成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 :可傳1-2代
消 化 液 :0.25%胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 :氣相:空氣,95%,。CO2,,5%

該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài),。


客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,用75%酒精消毒瓶身,,拆下封口膜,放入37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,,吸出多余胰蛋白/酶消化液,,37℃溫浴1-3min,。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,,再加入5ml完培終止消化,。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,,置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液,,1000rpm,,離心5min,保留沉淀,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化,。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,,接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),。
4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱),。
5) 原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理,。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),,需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,,避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn),。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),,明膠(0.1%),,依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被,。


注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,,胰/酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,,以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決。

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