| 供貨周期 |
現(xiàn)貨 |
規(guī)格 |
5*10^5 |
| 貨號 |
YLK-XB0736h |
應(yīng)用領(lǐng)域 |
化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 |
科研 |
組織來源 |
胰腺組織 |
小鼠胰腺星狀細胞分離自胰腺組織。胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分,。外分泌腺由腺泡和腺管組成,，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道,。胰液中含有碳酸/氫鈉,、胰蛋白/酶原,、脂肪酶、淀粉/酶等,。胰液通過胰腺管排入十二指腸,，有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用,。內(nèi)分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成,，胰島主要由4種細胞組成：α細胞、β細胞,、γ細胞及PP細胞,。α細胞分泌胰高血糖素，升高血糖,。β細胞分泌胰島素,，降低血糖
小鼠胰腺星狀細胞
產(chǎn)品名稱 ：小鼠胰腺星狀細胞
產(chǎn)品貨號 ：YLK-XB0736h
組織來源 ：胰腺組織
產(chǎn)品規(guī)格 ：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
細胞簡介：
胰腺星狀細胞分離自胰腺組織。胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分,。外分泌腺由腺泡和腺管組成,，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道,。胰液中含有碳酸/氫鈉,、胰蛋白/酶原、脂肪酶,、淀粉/酶等,。胰液通過胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質(zhì),、脂肪和糖的作用,。內(nèi)分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成，胰島主要由4種細胞組成：α細胞,、β細胞,、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素,，升高血糖,。β細胞分泌胰島素，降低血糖,。
γ細胞分泌生長/抑素,，以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌,。PP細胞分泌胰多肽,，抑制胃腸運動,、胰液分泌和膽囊收縮,。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征，活化的胰腺星狀細胞(PSC ) 是胰腺纖維化的主要效應(yīng)細胞，PSC 分離和成功培養(yǎng)是體外研究胰腺纖維化的重要前提,。未活性化的PSC 胞漿中富含維A 脂滴,，并表達D esmin蛋白，活化后的PSC則表達α-平滑肌肌動蛋白(alp h a-SM A ) ,。PSC 具有靜息態(tài)與激活態(tài)兩種,，并分別具有特異的標志物。
靜息狀態(tài)PSC 胞質(zhì)內(nèi)富含的維生素A 脂滴可以被油紅O 染成紅色,，陽性表達D esmin,。激活狀態(tài)PSC 陽性表達alp h a-SM A 。油紅O 染色發(fā)現(xiàn),，原代分離的細胞培養(yǎng)6d,，胞漿中仍可見明顯的脂滴，傳代后,，橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失,。免疫細胞化學(xué)染色顯示，細胞接種24h仍然表達D esmin,，48h后D esmin基本不再表達,。培養(yǎng)48h后絕大多數(shù)細胞開始表達alp h a-SM A，隨著培養(yǎng)時間的增長和傳代次數(shù)的增加,，細胞表達alp h a-SM A,，而不再表達D esmin，說明細胞活化,。
提示PSC接種24h后即啟動了激活過程,，至培養(yǎng)第6d大多數(shù)細胞激活，傳代后細胞處于高度激活狀態(tài),。原代胰腺星狀細胞可作為慢性胰腺炎新藥的細胞篩選模型,，目前研究發(fā)現(xiàn)：胰腺受損時，在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細胞活化,，導(dǎo)致細胞形態(tài),、功能發(fā)生變化，促使基質(zhì)增生,、膠原蛋白的大量生成及不規(guī)則沉積,。
細胞特性
1)組織來源于實驗動物的正常胰腺組織。
2)細胞鑒定：結(jié)蛋白（Desmin)或者平滑肌肌動蛋白（α-SMA）免疫熒光染色為陽性,。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%,。
4)不含有 HIV-1、 HBV,、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌,。
5)細胞生長方式：多角型或星型細胞,，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng),。
質(zhì)量檢測
優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有H IV -1,、H BV ,、H C V 、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 ：含F(xiàn)BS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：貼壁
細胞形態(tài) ：成纖維細胞樣
傳代特性 ：可傳3-5代左右
傳代比例 ：1:2
消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 ：氣相 ：空氣,，95% ,。C O2，5%
該細胞體外培養(yǎng)周期有限,。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液,，37℃溫浴1-3min,。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后,，再加入5ml完培終止消化,。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的完培至5mL,，置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
4) 待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培,。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液，1000rpm,，離心5min,，保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化,。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,，用5ml完培基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi),。
4) 待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱),。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理,。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進行包被,，以增強細胞貼壁性,，避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%），依據(jù)細胞種類而定,。懸浮/半懸浮細胞無需包被,。
注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，胰/酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通,。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決,。
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