人腎臟微血管內皮細胞
產(chǎn)品名稱 ：人腎臟微血管內皮細胞
產(chǎn)品貨號 ：YLK-XB0719h
組織來源 ：腎組織
產(chǎn)品規(guī)格 ：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
細胞簡介：
腎臟微血管內皮細胞分離自腎臟,；腎臟是人體的重要器官,，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內代謝產(chǎn)物及某些廢物,、毒物,，同時經(jīng)重吸收功能保留水分及其他有用物質，如葡萄糖、蛋白質,、氨基酸,、鈉離子、鉀離子,、碳酸/氫鈉等,，以調節(jié)水、電解質平衡及維護酸堿平衡,。腎臟同時還有內分泌功能，生成腎素,、促紅細胞生成素,、活性維生素D3、前列腺素,、激肽等,，又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,，保證了機體內環(huán)境的穩(wěn)定,，使新陳代謝得以正常進行。腎臟內部的結構,，可分為腎實質和腎盂兩部分,。在腎縱切面可以看到，腎實質分內外兩層：外層為皮質,，內層為髓質,。腎皮質位于腎實質表層，富含血管,，新鮮時呈紅褐色,，由一百多萬個腎單位組成。
每個腎單位由腎小體和腎小管所構成,，部分皮質伸展至髓質錐體間,，成為腎柱。腎髓質位于腎皮質的深面,，血管較少,，色淡紅，為10-20個錐體所構成,。腎錐體在切面上呈三角形,。錐體底部向腎凸面，jian端向腎門,，錐體主要組織為集合管,，錐體jian端稱腎乳頭，每一個乳頭有10-20個乳頭管,，向腎小盞漏斗部開口,。在腎竇內有腎小盞,，為漏斗形的膜狀小管，圍繞腎乳頭,。腎錐體與腎小盞相連接,。每腎有7～8個腎小盞，相鄰2～3個腎小盞合成一個腎大盞,。每腎有2～3個腎大盞,，腎大盞匯合成扁漏斗狀的腎盂。腎盂出腎門后逐漸縮窄變細,，移行為輸尿管,。
腎單位是腎臟結構和功能的基本單位。腎小體包括腎小球和腎小囊,。腎小體內有一個毛細血管團,，稱為腎小球，腎小球是個血管球,。它由腎動脈分支形成,。腎小球外有腎小囊包繞。腎小囊分兩層,，兩層之間有囊腔與腎小管的管腔相通,。腎小管匯成集合管。若干集合管匯合成乳頭管,，尿液由此流入腎小盞,。微血管又稱毛細血管。分布于各種組織和細胞間的最微細的血管,。介于微動脈和微靜脈之間,。平均直徑7～9微米，數(shù)量極多,，成網(wǎng)狀分布,。管壁由一層內皮細胞及一薄層基膜組成，厚約0.5微米,?；ね饷嬗斜咏Y締組織，其中有纖維細胞,、巨噬細胞和周細胞等,。最細的毛細血管由一個內皮細胞圍成管腔，較粗的毛細血管由2～3個內皮細胞圍成,。
分布于肌肉組織,、神經(jīng)組織和結締組織中的毛細血管，內皮細胞間為縫隙連接（縫隙寬150埃），稱連續(xù)毛細血管,；分布于內分泌腺,、腎臟等處的毛細血管，除有縫隙連接外,，細胞本身有許多小孔,，（孔徑800～1000埃），稱有孔毛細血管,；分布于肝,、脾、骨髓及某些內分泌腺的毛細血管,，管腔擴大,，稱血竇。毛細血管的管壁薄,、通透性大、管徑細（8～10微米）,、數(shù)量多,、血流速度慢，這些特點使其成為血液與組織液進行物質交換的場所,，又稱交換血管,。血竇（sinusoid）由毛細血管管腔擴大而成，竇壁的一般結構與毛細血管壁相同,，由單層內皮細胞構成,，某些內分泌腺的血竇有連續(xù)的基膜。
質量檢測
優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有H IV -1、H BV ,、H C V ,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 ： 含F(xiàn)BS、EGF,、bFGF,、IGF、VEGF,、Heparin,、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 ： 每2-3天換液一次
生長特性 ： 貼壁
細胞形態(tài) ： 內皮細胞樣
傳代特性 ： 可傳2-3代
傳代比例 ： 1:2
消 化 液 ： 0.25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 ： 氣相：空氣,，95% ,；C O2，5%
客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液,，37℃溫浴1-3min,。倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后,，再加入5ml完培終止消化,。
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補充新鮮的完培至5mL,，置于37℃、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
4) 待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培,。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液，1000rpm,，離心5min,，保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內加入5ml完培終止消化,。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,，用5ml完培基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內。
4) 待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
5) 原瓶內貼壁細胞按正常消化處理,。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性,，避免細胞因沒貼好影響實驗,。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）,，依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被,。
注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰/酶消化時間不宜過長,，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài),，便于和公司技術部溝通,。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決
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