人子宮肌瘤組織源細(xì)胞
產(chǎn)品名稱 :人子宮肌瘤組織源細(xì)胞
產(chǎn)品貨號(hào) :YLK-XB0645h
組織來源 :子宮肌瘤組織
產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
子宮肌瘤組織源細(xì)胞分離自癌組織。癌(can cer) 是指起源于上皮組織的惡性腫瘤,,是惡性腫瘤中最常見的一類,。相對(duì)應(yīng)的,起源于間葉組織的惡性腫瘤統(tǒng)稱為肉瘤,。
有少數(shù)惡性腫瘤不按上述原則命名,,如腎母細(xì)胞瘤、惡性畸胎瘤等,。一般人們所說的“癌癥"習(xí)慣上泛指所有惡性腫瘤,。癌癥具有細(xì)胞分化和增殖異常,、生長(zhǎng)失去控制、浸潤(rùn)性和轉(zhuǎn)移性等生物學(xué)特征,,其發(fā)生是一個(gè)多因子,、多步驟的復(fù)雜過程,分為致癌,、促癌,、演進(jìn)三個(gè)過程,與吸煙,、感染,、職業(yè)暴露、環(huán)境污染,、不合理膳食,、遺傳因素密切相關(guān)。癌細(xì)胞,,是一種變異的細(xì)胞,,是產(chǎn)生癌癥的病源。癌細(xì)胞與正常細(xì)胞不同,,有無限增殖,、可轉(zhuǎn)化和易轉(zhuǎn)移三大特點(diǎn),能夠無限增殖并破壞正常的細(xì)胞組織,。癌細(xì)胞除了分裂失控外(能進(jìn)行多極分裂) ,,還會(huì)局部侵入周圍正常組織甚至經(jīng)由體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)或淋巴系統(tǒng)轉(zhuǎn)移到身體其他部分。分惡性和良性兩種,。
質(zhì)量檢測(cè)
優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有H IV -1,、H BV ,、H C V 、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 :貼壁
細(xì)胞形態(tài) :梭形,、多角形
傳代特性 :可傳3-5代左右,。3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% ,。C O2,,5%
客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,用75%酒精消毒瓶身,,拆下封口膜,放入37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min,。倒置顯微鏡下觀察,,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化,。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,,置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
4) 待細(xì)胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培,。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液,,1000rpm,離心5min,,保留沉淀,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,,用5ml完培基重懸沉淀,,接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱),。
5) 原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片,、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),,需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn),。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),,依據(jù)細(xì)胞種類而定,。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。
注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,,請(qǐng)注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,,胰/酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),,否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,,記錄細(xì)胞狀態(tài),,便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,,以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決。