人腹膜毛細血管內(nèi)皮細胞
產(chǎn)品名稱 ：人腹膜毛細血管內(nèi)皮細胞
產(chǎn)品貨號 ：YLK-XB0588h
組織來源 ：腹膜組織
產(chǎn)品規(guī)格 ：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
細胞簡介：
腹膜毛細血管內(nèi)皮細胞分離自腹膜組織,。腹膜是存在于高等脊椎動物腹腔中的一層黏膜,，主要由間皮細胞和間質(zhì)(結(jié)締組織、纖維,、毛細血管,、淋巴管) 構(gòu)成,，藉由結(jié)締組織的支持所形成的一層膜狀組織。腹膜包覆大部分腹腔內(nèi)的器官,，能分泌黏液潤濕臟器的表面,，減輕臟器間的摩擦。腹腔臟器的血液,、淋巴和神經(jīng)組織經(jīng)由腹膜與外界相連,。腹膜也具有吸收撞擊保護內(nèi)臟的效果。腹膜(peritoneum ) 為全身面積最大,、配布最復雜的漿膜,，由皮及少量結(jié)締組織構(gòu)成，薄而光滑,，呈半透明狀,。
襯于腹、盆腔壁內(nèi)表面的腹膜稱為壁腹膜(p arie tal-p eritoneum ) 或腹壁薄層,。覆蓋腹,、盆腔器表面的部分稱為臟腹膜(visc eral-p eritoneum ) 腹膜或腹膜臟層。臟腹膜與壁腹膜互相延續(xù),、移行,，共同圍成不規(guī)則的潛在性腔隙，稱為腹膜腔(peritoneal-cavity) ,。腹膜腔是臟,、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙,。腹膜腔內(nèi)有少量漿液,，在臟器活動時可減少摩擦。
腹膜的主要生理功能
① 分泌功能,。
② 吸收功能,。
③ 再生能力。
④ 防御功能,。
⑤ 調(diào)理功能,。臟、壁腹膜都有豐富的毛細血管,，毛細血管上有不同的孔徑,。腹膜的毛細血管和毛細血管后靜脈是進行溶質(zhì)交換的主要場所。
質(zhì)量檢測
優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有H IV -1、H BV ,、H C V ,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息
包被條件 ：PLL(0. 1m g/ml) ,，明膠(0. 1%)
培 養(yǎng) 基 ：含F(xiàn)BS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長特性 ：貼壁
細胞形態(tài) ：內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 ：可傳2-3代
傳代比例 ：1:2
消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 ：氣相 ：空氣，95% ,。C O2,，5%
該細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài),。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜，放入37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃溫浴1-3min,。倒置顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完培終止消化,。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的完培至5mL,，置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
4) 待細胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液,，1000rpm,，離心5min，保留沉淀,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化,。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清，用5ml完培基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi),。
4) 待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱),。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實驗器皿進行包被,，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗,。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）,，依據(jù)細胞種類而定,。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，胰/酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和公司技術部溝通,。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決。
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