| 供貨周期 |
現(xiàn)貨 |
規(guī)格 |
5*10^5 |
| 貨號(hào) |
YLK-XB0567h |
應(yīng)用領(lǐng)域 |
化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 |
科研 |
組織來(lái)源 |
腎組織 |
人腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞分離自腎組織,。腎臟是機(jī)體的重要器官,，它的基本功能是生成尿液,，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,，同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),，如葡萄糖、蛋白質(zhì),、氨基酸,、鈉離子、鉀離子,、碳酸/氫鈉等,，以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡,。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能,，生成腎素、促紅細(xì)胞生成素,、活性維生素D3,、前列腺素、激肽等,，又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場(chǎng)所和腎外激素的靶器官,。
人腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞
產(chǎn)品名稱 ：人腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞
產(chǎn)品貨號(hào) ：YLK-XB0567h
組織來(lái)源 ：腎組織
產(chǎn)品規(guī)格 ：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞分離自腎組織。腎臟是機(jī)體的重要器官,，它的基本功能是生成尿液,，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,，同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),，如葡萄糖、蛋白質(zhì),、氨基酸,、鈉離子、鉀離子,、碳酸/氫鈉等,，以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡,。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能，生成腎素,、促紅細(xì)胞生成素,、活性維生素D3、前列腺素、激肽等,，又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場(chǎng)所和腎外激素的靶器官,。
腎臟的這些功能，保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,，使新陳代謝得以正常進(jìn)行,。腎臟移植是臨床上治療慢性腎功能衰竭的有效方法，然而這種方法受到供體腎短缺的限制,。腎細(xì)胞移植可部分解決供體腎短缺的問(wèn)題,，是未來(lái)可以替代腎臟移植的Z有效方法。因此,，體外腎細(xì)胞的培養(yǎng)受到國(guó)內(nèi)外有關(guān)專家的密切關(guān)注,。
原代腎細(xì)胞作為一種常用的腎臟毒理學(xué)研究對(duì)象，其分離方法主要有機(jī)械研磨分離法和酶消化法,，酶消化法因?qū)?xì)胞損傷小,、分離效果好而優(yōu)于機(jī)械研磨分離法。目前常用的酶消化法主要是胰蛋白/酶消化法和膠原酶消化法,。
質(zhì)量檢測(cè)
優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有H IV -1,、H BV ,、H C V 、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
包被條件 ：鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm 2)
培 養(yǎng) 基 ：含F(xiàn)BS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 ：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 ：貼壁
細(xì)胞形態(tài) ：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 ：可傳3代左右
傳代比例 ：1:2
消 化 液 ：0. 25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 ：氣相 ：空氣,，95% ,。C O2，5%
該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限,。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
客戶收到細(xì)胞后,，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜,，放入37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃溫浴1-3min,。倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml完培終止消化,。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,，置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
4) 待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培,。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1) 收集所有細(xì)胞懸液,，1000rpm，離心5min,，保留沉淀,。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,，用5ml完培基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。
4) 待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
5) 原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理,。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí),，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,，避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn),。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）,，依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被,。
注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,，胰/酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通,。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,，詳盡告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決,。
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