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參考價	面議

科研細(xì)胞

細(xì)胞系

原代細(xì)胞

供貨周期	現(xiàn)貨	規(guī)格	5*10^5
貨號	YLK-XB0524h	應(yīng)用領(lǐng)域	化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途	科研	組織來源	氣管

人氣管平滑肌細(xì)胞平滑肌即無紋肌的通稱,，平滑肌是由長紡錘形的單核細(xì)胞構(gòu)成。它不構(gòu)成獨(dú)立的器官,，而只是成為構(gòu)成體壁和內(nèi)臟壁的因素（肌層）,。平滑肌細(xì)胞互相連接,，形成管狀結(jié)構(gòu)或中空器官；在功能上可以通過縮短和產(chǎn)生張力使器官發(fā)生運(yùn)動和變形,，也可產(chǎn)生連續(xù)收縮或緊張性收縮,，使器官對抗所加負(fù)荷而保持原有的形狀,。

詳細(xì)介紹

人氣管平滑肌細(xì)胞

產(chǎn)品名稱：人氣管平滑肌細(xì)胞

產(chǎn)品貨號：YLK-XB0524h

組織來源：氣管

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡介：

該細(xì)胞分離自氣管組織。氣管(T rachea) ,，呼吸器官的一部分,。為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣,，與環(huán)狀軟骨相連,。

向下至第四、五胸椎體(相當(dāng)胸骨角平面) 交界處,，分左,、右主支氣管，分叉處稱為氣管杈,。氣管主要由14-16個半環(huán)狀軟骨構(gòu)成,，有彈性，軟骨為“C"字形的軟骨環(huán),，缺口向后,，各軟骨環(huán)以韌帶連接起來，環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接,，保持了持續(xù)張開狀態(tài),。管腔襯以粘膜，表面覆蓋纖毛上皮,，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,，纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出，以凈化吸入的氣體,。氣管平滑肌是氣管的重要結(jié)構(gòu)組成之一,，在機(jī)體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。能夠保持氣道張力,，維持氣道管狀形態(tài),，從而有利于氣體流通,，保持肺部通氣,。

氣管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展,，細(xì)胞形態(tài)大小不一,，呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,，核卵圓形、居中,。2周后細(xì)胞匯合,，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,，胞漿豐富，有分枝狀突起,，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,，高低起伏。細(xì)胞密度低時,，常交織成網(wǎng)狀,。密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長較快,，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn),。氣管平滑肌細(xì)胞的異常是呼吸道疾病的重要病理特征之一,，其增生、肥大是氣道重塑的關(guān)鍵,。

細(xì)胞特性
1)細(xì)胞來源于人正常氣管組織,。
2)細(xì)胞鑒定：平滑肌肌動蛋白（α-SMA）免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于 90%,。
4)不含有 HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌,。
5)細(xì)胞生長方式：長梭狀細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng)。

質(zhì)量檢測

優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有H IV -1、H BV ,、H C V ,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息

培養(yǎng) 基：含F(xiàn)BS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptom ycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài) ：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳5代左右。3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

傳代比例：1:2

消化液：0. 25% 胰蛋白/酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95% ,。C O2,，5%

該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài),。

客戶收到細(xì)胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜，放入37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

2. 貼壁細(xì)胞消化

1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細(xì)胞一次。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃溫浴1-3min,。倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml完培終止消化,。

3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,，置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。

4) 待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培,。

3. 細(xì)胞收貨脫落

1) 收集所有細(xì)胞懸液,，1000rpm，離心5min,，保留沉淀,。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀,，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化,。

3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,，用5ml完培基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。

4) 待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。

5) 原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理,。

4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性,，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時,，需要對實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,，避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn),。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）,，依據(jù)細(xì)胞種類而定,。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被,。

注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月,。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,。

3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰/酶消化時間不宜過長,，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和公司技術(shù)部溝通,。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系,，詳盡告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決,。