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參考價(jià)	面議

科研細(xì)胞

細(xì)胞系

原代細(xì)胞

供貨周期	現(xiàn)貨	規(guī)格	5*10^5
貨號	YLK-XB0519h	應(yīng)用領(lǐng)域	化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途	科研	組織來源	肺動脈組織

人肺動脈成纖維細(xì)胞肺動脈起于右心室,，在主動脈之前向左上后方斜行,，在主動脈弓下方分為左、右肺動脈,，經(jīng)肺門入肺。
肺動脈是由內(nèi)膜,、中層彈力層和外膜構(gòu)成,，三層緊密貼合在一起。其中,，外膜是專門的支持組織,，外膜成纖維是外膜的主要成分，在血管炎癥反應(yīng),、血管重塑等方面發(fā)揮重要作用,。

詳細(xì)介紹

人肺動脈成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品名稱：人肺動脈成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品貨號：YLK-XB0519h

組織來源：肺動脈組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡介：

人肺動脈成纖維細(xì)胞分離自肺動脈組織。肺動脈亦稱肺動脈干,。在呼吸空氣的脊椎動物中,，把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動脈。

肺大動脈起于右心室,，在主動脈之前向左上后方斜行,，在主動脈弓下方分為左、右肺動脈,，經(jīng)肺門入肺,。肺動脈干位于心包內(nèi)，為一粗短的動脈干,。起自右心室,，在升主動脈前方向左后上方斜行，至主動脈弓下方分為左,、右肺動脈,。左肺動脈較短,，在左主支氣管前方橫行，分二支進(jìn)入左肺上,、下葉,。

右肺動脈較長而粗，經(jīng)升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行,，至右肺門處分為三支進(jìn)入右肺上,、中、下葉,。成纖維細(xì)胞(Fibroblast) 是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化,。成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。

剛分離的肺動脈成纖維細(xì)胞呈圓形,、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基中30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足,，表現(xiàn)為小的突起,。6h后細(xì)胞基本貼壁完成，伸展成梭形,，胞核清晰,，分布較均勻，散在生長,，不聚集成團(tuán),。細(xì)胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài),，細(xì)胞排列緊密,，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大,，細(xì)胞質(zhì)透明,，細(xì)胞核較大，呈橢圓形,，顏色淡。細(xì)胞融合,，并彼此連接成網(wǎng)狀,。細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。肺動脈成纖維細(xì)胞在生理?xiàng)l件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持肺動脈的正常形態(tài),。合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì),。組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。

細(xì)胞特性

1) 組織來源于人的正常肺動脈組織,。

2) 細(xì)胞鑒定：Vimentin免疫熒光染色為陽性,。

3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌。

5）細(xì)胞生長方式：長梭狀細(xì)胞,，貼壁培養(yǎng),。

質(zhì)量檢測

優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有H IV -1,、H BV 、H C V ,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息

培養(yǎng) 基：含F(xiàn)BS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptom ycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài) ：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳5代左右,。3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

傳代比例：1:2

消化液：0. 25% 胰蛋白/酶

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95% ,。C O2,，5%

該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài),。

客戶收到細(xì)胞后,，請按照以下方法進(jìn)行操作

1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜,，放入37℃、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 貼壁細(xì)胞消化

1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細(xì)胞一次,。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余胰蛋白/酶消化液,，37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后,，再加入5ml完培終止消化。

3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL，置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

4) 待細(xì)胞貼壁后,，培養(yǎng)觀察,。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。

3. 細(xì)胞收貨脫落

1) 收集所有細(xì)胞懸液,，1000rpm,，離心5min，保留沉淀,。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min),。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化,。

3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清，用5ml完培基重懸沉淀,，接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi),。

4) 待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱),。

5) 原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理,。

4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片,、培養(yǎng)板,、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí)，需要對實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,，避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ,，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）,，依據(jù)細(xì)胞種類而定,。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。

注意事項(xiàng)

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月,。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,，胰/酶消化時(shí)間不宜過長,，否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài),，便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,，請及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤,、回訪直至問題得到解決。