目錄:優(yōu)利科（上海）生命科學(xué)有限公司>>科研細(xì)胞>>細(xì)胞系>> 復(fù)蘇/凍存B10BR小鼠永生化黑素細(xì)胞
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | YLK-XB0510h | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 科研 | 生長特性 | 貼壁 |
B10BR小鼠永生化黑素細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)操作步驟：
1. 吸走多余培養(yǎng)基，加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,；
2. 吸干凈PBS后
加入1mL 0.25%胰-酶-0.53mM EDTA,，輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰-酶浸沒細(xì)胞表面，培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化,；
（細(xì)胞對于消化比較敏感,，消化過度會嚴(yán)重影響細(xì)胞狀態(tài)，導(dǎo)致細(xì)胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長,。細(xì)胞消化到細(xì)胞間隙變大但未脫落,，可以輕輕吹下時即可終止，禁止消化到細(xì)胞*漂浮,?；靹蚣?xì)胞時盡量輕柔，不要吹出大量氣泡,。）
3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基終止消化,，輕輕吹下細(xì)胞混勻；
4. 將混勻的細(xì)胞1000rpm（約150g）離心3min,，棄上清,，再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)；
傳代比例: 不同細(xì)胞生長速度不一,，具體傳代比例視細(xì)胞生長速度而定,，大部分細(xì)胞適用1:3-1:4傳代，生長較慢的細(xì)胞可以1:2傳代,。
Cell cryopreservation
1.凍存液：92%*培養(yǎng)基+8%DMSO（可以根據(jù)實驗室條件自行選擇）
2.降溫步驟：4度10min,，-20度2h，-80過夜后液氮保存,。
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