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AtT-20小鼠垂體瘤細(xì)胞

簡(jiǎn)稱：AtT-20

中文名：小鼠垂體瘤細(xì)胞

別名：AtT20; AtT 20; ATT-20

種屬：小鼠

來源：垂體,；瘤

培養(yǎng)基：F-12k

狀態(tài)：半貼壁

NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

細(xì)胞培養(yǎng)操作步驟：

1. 吸走多余培養(yǎng)基,，加入3-5mL PBS后輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞,；

2. 吸干凈PBS后

加入1mL 0.25%胰-酶-0.53mM EDTA,，輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰-酶浸沒細(xì)胞表面，培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化,；

（細(xì)胞對(duì)于消化比較敏感,，消化過度會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞狀態(tài)，導(dǎo)致細(xì)胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長(zhǎng),。細(xì)胞消化到細(xì)胞間隙變大但未脫落,，可以輕輕吹下時(shí)即可終止，禁止消化到細(xì)胞*漂浮,?；靹蚣?xì)胞時(shí)盡量輕柔，不要吹出大量氣泡,。）

3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基終止消化,，輕輕吹下細(xì)胞混勻；

4. 將混勻的細(xì)胞1000rpm（約150g）離心3min,，棄上清,，再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)；

傳代比例: 不同細(xì)胞生長(zhǎng)速度不一,，具體傳代比例視細(xì)胞生長(zhǎng)速度而定,，大部分細(xì)胞適用1:3-1:4傳代，生長(zhǎng)較慢的細(xì)胞可以1:2傳代,。

Cell cryopreservation

1.凍存液：92%*培養(yǎng)基+8%DMSO（可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件自行選擇）

2.降溫步驟：4度10min，-20度2h,，-80過夜后液氮保存,。

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