志賀菌屬是主要的腸道致病菌之一,,是引起人類細菌性痢疾的病原體。以下從生物學(xué)性狀,、臨床意義,、微生物學(xué)檢驗等方面為你詳細介紹志賀菌屬相關(guān)技術(shù)內(nèi)容。
生物學(xué)性狀
形態(tài)與染色
志賀菌屬為G - 短桿菌,,無鞭毛,,無莢膜,有菌毛,,不形成芽胞,。
培養(yǎng)特性
兼性厭氧,營養(yǎng)要求不高,。因不發(fā)酵乳糖,,在腸道選擇性培養(yǎng)基上形成無色菌落(宋內(nèi)志賀菌遲緩發(fā)酵),,例如福氏志賀菌在SS平板上及中國藍平板上呈現(xiàn)無色菌落。
生化反應(yīng)
氧化酶陰性,,不分解乳糖(宋內(nèi)遲緩分解),,分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。A群不分解甘露醇,、D群β - 半乳糖苷酶 +,、鳥氨酸脫羧酶試驗陽性。O抗原是分類的依據(jù),,O抗原分為群特異性抗原和型特異性抗原,。志賀菌分為4個血清群,,44個血清型,。
抗原結(jié)構(gòu)
只有O、K抗原,,無H抗原,。
抵抗力
較弱,對酸敏感,。
志賀菌屬分類
A群:痢疾志賀菌(S.dysenteriae),,有10個血清型,是唯-一不發(fā)酵甘露醇的一群志賀菌,。
B群:福氏志賀菌(S.flexneri),,有13個血清型(包括變型和亞型),各型間有交叉反應(yīng),。
C群:鮑氏志賀菌(S.boydii),,有18個血清型。
D群:宋氏志賀菌(S.sonnei),,抗原單一,,只有1個血清型。是唯-一具有鳥氨酸脫羧酶的一群志賀菌,。宋氏志賀菌有I相和I相兩個交叉變異相,。I相形成S型菌落,對小鼠有致病力,,多自急性期感染病人標本中分離得到,。I相為R型菌落,對小鼠不致病,,常從慢性病人或帶菌者中檢出,。I相抗原受控于一個大質(zhì)粒,若質(zhì)粒丟失,,I相抗原不能合成,,菌則從有毒的I相轉(zhuǎn)變?yōu)闊o毒的I相,。
臨床意義
致病物質(zhì)
-普通菌毛:能黏附于腸粘膜上皮細胞,引起炎癥反應(yīng),,是定植因子,。
-內(nèi)毒素:可引發(fā)腸毒素性、神經(jīng)毒性和細胞毒性等多種毒性反應(yīng),。
-外毒素(Vero毒素):同樣具有較強的致病作用,。
所致疾病
-細菌性痢疾:包括急性菌痢、慢性菌痢,、中毒性菌痢,,還存在帶菌者情況。
微生物學(xué)檢驗
標本采集
最好在治療前采集黏液膿血便,,如不能及時接種,,需置于甘油保存液或卡 - 布運送培養(yǎng)基運送,必要時采集肛拭子,。
標本直接檢查
可用膠乳凝集試驗和免疫熒光技術(shù)檢測抗原,,也可以直接檢測核酸。
分離培養(yǎng)
使用SS平板和中國藍平板,,志賀菌在SS平板和中國藍平板上形成無色菌落(宋內(nèi)志賀菌培養(yǎng)48 - 72小時為有色菌落,,遲緩發(fā)酵乳糖)。也可使用XLD瓊脂平板和MAC瓊脂平板或志賀氏顯色培養(yǎng)基等進行分離,。
鑒定
-初步鑒定:用KIA和MIU,。將在KIA上出現(xiàn)KA--,MIU上出現(xiàn) - +/--,,可進一步鑒定到屬和種,,后續(xù)還需進行生化和血清學(xué)試驗。例如A群甘露醇 -,;D群β - 半乳糖苷酶 +,,鳥氨酸 + 。
-最終鑒定:依全面生化反應(yīng)及血清學(xué)試驗作出最終鑒定,。生化反應(yīng)確定到志賀菌屬后,,繼續(xù)做血清學(xué)試驗鑒定到群、型,。先與志賀菌屬多價診斷血清(A群1,,2型、B群1 - 6型,、C群1 - 6型及D群)做玻片凝集試驗,,凝集者進一步做群、型鑒定。
鑒別試驗
-與大腸埃希菌的鑒別:志賀菌屬與大腸埃希菌之間的DNA相關(guān)性很高,,尤其是與EIEC在生化特征上難以鑒別,,在血清學(xué)上有交叉反應(yīng)。下述特性有助于鑒定志賀菌種:①無動力,,賴氨酸陰性,;②發(fā)酵糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣(福氏志賀菌6型、鮑氏志賀菌13和14型,、痢疾志賀菌3型除外),;③醋酸鈉 -、葡萄糖銨 -,、粘質(zhì)酸鹽 - ,。
-與類志賀鄰單胞菌鑒別:可用動力和氧化酶試驗加以鑒別,志賀菌屬均為陰性,,而類志賀鄰單胞菌為陽性,。
-與傷寒沙門菌鑒別:傷寒沙門菌在KIA培養(yǎng)基上的表現(xiàn)與志賀菌相似,鑒別點是傷寒沙門菌硫化氫和動力陽性,,能與沙門菌屬因子血清(OA - F,、O9,、Vi)凝集而不與志賀菌屬因子血清凝集,。
-血清學(xué)鑒定:凡生化反應(yīng)符合志賀菌屬者均需作血清學(xué)鑒定,可先用志賀菌屬4種多價血清作玻片凝集試驗,,凝集者再進一步作定型鑒定,。我國現(xiàn)有的定群及定型診斷血清包括痢疾志賀菌1型和2型血清,福氏志賀菌(1 - 6型)血清,,鮑特志賀菌(1 - 6型)和宋內(nèi)志賀菌血清,。
在國內(nèi)各地報告的志賀菌屬感染以(B群)福氏志賀菌為多見,約占總數(shù)的70%以上,,其次為(D群)宋內(nèi)志賀菌及A群2型,。在B群中又以1b、2a及3型居多,。
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