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原代細胞培養(yǎng)的主要注意事項

閱讀:569      發(fā)布時間:2024-10-22
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原代小梁網(wǎng)細胞培養(yǎng)體系是一個為體外生長的人,、大鼠、小鼠,、兔等哺乳動物的小梁網(wǎng)細胞設計的理想的完培方案,。本體系是一個基于碳酸氫鹽的緩沖體系,可以在孵育的5%的CO2的氣體環(huán)境下維持一個圍繞pH7.2的酸堿緩沖體系,。本體系是一個無菌的液體混合系統(tǒng),,其中包含必須和非必須氨基酸、維生素,、激素,、生長因子,、微量元素和一些其他的有機和無機化合物以及胎牛血清(10%)。本培養(yǎng)體系是基于固定配方配制的液態(tài)培養(yǎng)體系,,可以為體外培養(yǎng)的人,、大鼠、小鼠,、兔等哺乳動物的小梁網(wǎng)細胞提供一個確定適宜的平衡營養(yǎng)環(huán)境,,并且可以選擇性的促進小梁網(wǎng)細胞的擴增。
注意事項:
1,、組織塊培養(yǎng)法:
(1)剛接種后,,組織塊粘附不牢固,觀察和轉移過程中動作要輕,,以防引起液體振蕩,,使組織塊漂起
(2)培養(yǎng)初期,要注意觀察有無細菌,、霉菌污染
(3)原代培養(yǎng)要及時觀察,,記錄
(4)過3-5天,需要換液以除去漂浮組織塊和殘留的血細胞,,保證原代細胞正常生長
2,、消化培養(yǎng)法:某些特殊類型細胞如內(nèi)皮細胞需用特殊的消化手段和步驟進行
3、器官培養(yǎng)和組織塊培養(yǎng)類似
4,、懸浮細胞培養(yǎng)法:注意調整細胞濃度

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